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- 2025年12月25日
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- 服务名称：
慢病毒包装/AAV腺相关病毒包装/腺病毒包装包装/shRNA/RNAi/基因过表达/microRNA/lncRNA载体构建/稳定细胞株筛选/稳转株构建
- 提供商：
吉满/Genomeditech
病毒包装服务：慢病毒、腺病毒、腺相关病毒、杆状病毒等；
载体构建：过表达载体、shRNA表达载体、miRNA表达载体、lncRNA、点突变、基因调取、基因合成等；
细胞功能实验：细胞增殖，克隆形成，细胞周期， 细胞凋亡，细胞迁移、侵袭，细胞划痕，Western Blot，免疫共沉淀等；蛋白表达与纯化：原核蛋白、真核蛋白、昆虫杆状病毒蛋白等；
专题研究：miRNA及靶基因研究，lncRNA研究，肿瘤整体研究，细胞永生化研究，细胞通路报告基因，IPS细胞诱导相关研究，细胞自噬研究，细胞示踪和细胞定位研究等；
产品：aav光遗传产品，100种以上报告基因系列现货，现货ORF克隆、miRNA克隆、shRNA克隆和shRNA文库，最全的IPS细胞诱导基因产品，支原体检测与清除试剂，cre，SV40T慢病毒腺病毒，luciferase活体成像病毒与试剂等。
吉满生物拥有成熟的病毒包装技术，为客户提供多种病毒包装服务，内容包括以HIV为基础发展起来的慢病毒（Lentivirus）、各种血清型的腺相关病毒（AAV）和腺病毒(Adenovirus)等。
病毒的感染效率比质粒进行感染效率高，因此特别适合用于难转染的细胞中外源基因的转染与表达（例如：神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞等）。
各种病毒的特点：
| 病毒表达系统 | 腺病毒表达系统 | 慢病毒表达系统 | 腺相关病毒系统 |
| 病毒基因组 | 双链DNA病毒 | RNA病毒 | 单链DNA病毒 |
| 是否整合 | 病毒基因组游离于宿主基因组外，瞬时表达外源基因 | 病毒基因组整合于宿主基因组，长时间、稳定表达外源基因 | 低频整合 |
| 感染细胞类型 | 感染分裂和不分裂细胞 | 感染分裂和不分裂细胞 | 分裂和非分裂细胞 |
| 表达丰度 | 高水平表达 | 高水平表达 | 高水平表达 |
| 表达时间 | 快（1-2 天） | 慢（2-4 天） | 快（1-2 天） |
| 滴度 | 滴度高达1E12pfu/mL | 最高可达1E9－1E 10TU/ mL | 最高可达1E9－1E 13V.G/ mL |
| 克隆容量 | 可插入高达8kb的外源片段，滴度随插入片段长度增加而降低 | 可插入不超过8kb的外源片段，滴度随插入片段长度增加而降低 | 可插入不超过3 kb外源DNA片段，滴度随插入片段长度增加而降低 |
| 免疫原性 | 高免疫原性 | 低免疫原性 | 低免疫原性 |
| 动物模型 | 不能得到转基因动物 | 可产生转基因动物，效率达50以上 | 可产生转基因动物 |
| 启动子 | 可以更换特异性启动子 | 可以更换特异性启动子 | 可以更换特异性启动子 |
| 能否用于MIRCORNA | 可以 | 可以 | 可以 |
| 能否用于四环素诱导 | 不可以 | TET-ON,TET-OFF | TET-ON,TET-OFF |
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文献和实验克隆策略（酶切位点不符） 6. 腺病毒包装不成功原因分析 7. pExpress-1载体图谱 8. 腺病毒传递啊、滴度与感染试验 9. 腺病毒CsCl纯化、保存 Page 23： 1. 腺病毒CsCl纯化注意事项 2. 腺病毒体外感染细胞 3. 转染重组shuttle不能获得腺病毒 4. 腺病毒收获与增殖 5. westernblot鉴定 6. 穿梭载体亚克隆 7. 腺病毒感染最佳MOI Page 24： 1. 表达shRNA、microRNA重组腺病毒鉴定与后续
A细胞（可表达E1基因），使腺病毒能顺利完成复制扩增（图3）。大家可以根据自己的实验需求针对性选择，两种系统的具体特点比较见表1。 表1 腺病毒两种包装系统的对比 图1 AdMax系统包装原理示意图 图2 AdEasy系统包装原理示意图 图3 腺病毒包装过程示意图 那么有哪些腺病毒产品可供选择呢？ 在此之前，我们先看看它是如何感染细胞的。首先，腺病毒衣壳主要由三种蛋白组成：六邻体蛋白、五邻体蛋白、纤突蛋白。每个五邻体蛋白上结合着一根纤突蛋白。在腺病毒感染细胞的过程中
的研究中，为了感染原代细胞和难感染的细胞系，科学家开始借助于病毒载体实现RNAi；由于慢病毒可以同时感染分裂和非分裂细胞、整合性以及免疫原性低等优点，目前在RNAi的研究中，基于慢病毒构建的shRNA被最广泛的使用。而在RNAi研究需要长期观察或者需要进行动物实验时，基于慢病毒构建的shRNA的优势更为明显。 慢病毒的应用前景相当广。。。 ddandgg 请问慢病毒包装必须用293T细胞吗? jiachengyou2007
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