- ¥200 - 1500
- MLCC
- 武汉
- CCell0001
- 2026年08月03日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
产品信息：
名称：DH5α化学感受态细胞
品牌：MLCC
货号：MLCC3002
规格：10管，100ul/管
储存温度：-80℃
基因组：
F- 80lacZ△M15△ (lacZYA-argF) U169 endA1 recA1hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi-1 gyrA96 relA1 phoA
产品简介：
本公司生产的该产品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA 的热击转化。DH5α是一种常用于质粒克隆的菌株，其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补，可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108，适用于高效的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。
操作说明：
1，收到本产品请直接冻存于-80℃冰箱备用。
2，取冻存于-80度冰箱的100μl感受态细胞于冰上融化。
3，加入1μl纯质粒或10ul连接产物，轻轻吹打混匀，冰浴30 min。
4，将菌液放入42℃水浴中热激90秒，立即放入冰浴中5 min。
5，加入800ul LB，于37℃恒温摇床上150rpm×45min温育。
6，将菌液4000rpm/min离心3min，留200μl上清将菌体打散，均匀涂布于含适当浓度的相应抗生素的琼脂平板表面，平板于37℃可先正放置1h,待液体吸收完毕，再倒置培养过夜。
注：①：新倒的平板可于37℃培养箱中预先放置至干燥。
②：当转化的是TA克隆连接产物时可在菌液中加入8μl 1M IPTG和40μl 20mg/ml X-gal以进行蓝白斑筛选。
注意事项：
1，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2，本品仅可用于实验室研究，不能用于动物，人体以及作为食品添加剂等用途。
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文献和实验The Inoue Method for Preparation and Transformation of Competent E. coli: "Ultra Competent" Cells Joseph Sambrook Peter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne
摘要： 有人提出, 冻存后转化效率降低且这种方法不适合大质粒.以下转贴为coli感受态细胞制备方法,具体方法请最好查阅文献. 摘要: 但有人提出, 冻存后转化效率降低, 且这种方法不适合大质粒.以下为转贴,具体方法请最好查阅文献E.coli 感受态细胞 制备方法：单菌落平板至2ml LB, 37 oC 250 r/m ovn
to an ice bath. 10. Distribute aliquots 100 µl with chilled, sterile pipette tip into chilled 1.5 ml microcentrifuge tubes. 11. Flash freeze in liquid nitrogen, then place at -70°C. 如果用来建库或者转化比较珍贵的材料可以试一下这种感受态！效率非常高！ 更多相关链接（生物谷） 试剂
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