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- 可直接用于细胞株瞬时转染,可作为cDNA过表达克隆的对照。
- 2026年01月12日
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cDNA克隆对照
- 提供商：
上海吉凯基因
| cDNA克隆对照
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产品描述
产品属性
相关产品上海吉凯基因医学科技股份有限公司 地址：上海张江高科技园区爱迪生路332号 邮编：201203 全国热线：4006210302 售前顾问：13818254889；17600138744 邮箱：service@genechem.com.cn URL：https://www.genechem.com.cn/ 
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文献和实验一．原理 (1) 以目的mRNA 为模板，使用Oligo dT-3sites Adaptor Primer 进行反转录反应，合成1st Strand cDNA。 (2) 使用含有KpnI、XbaI、BamH I 酶切位点的上游特异性引物和3sites Adaptor Primer进行PCR反应。 (3) 使用限制性酶（KpnI、XbaI或BamH I）对PCR产物进行酶切反应。 (4) 选用适当载体克隆
PCR 产物在 1% 琼脂糖凝胶上进行电泳分离。回收纯化电泳片段克隆到pMD-18T 载体，进行鉴定和序列分析（方法同实验六、实验七）。 (6)获得cDNA 5’末端序列后，将其与cDNA 的核心片断及3’末端序进行拼接。这就获得了cDNA的全序列。
第二军医大学细胞生物学教研室；上海200433 何志颖；姚玉成（综述）；胡以平（审校） 关键词：EST技术；“电子”基因克隆；生物信息学；基因 摘要： 随着人类基因组计划的顺利进行，EST技术被广泛应用于基因识别、绘制基因表达图谱、寻找新基因等研究领域。利用人类基因组研究不断产生的数据，从ESTs即cDNA的部分序列入手，通过同源筛选，获得基因部分乃至全长cDNA序列，避免或减轻了构建与筛选cDNA文库等繁锁实验室工作。本文从原理、应用及其在科学研究上产生的影响等方面对EST技术
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