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- 卡梅德生物科技（天津）有限公司作为国家高新技术企业，专注于为全球科学家和研究机构提供天然蛋白提取与发酵、重组蛋白定制表达服务，单、多克隆抗体开发，噬菌体文库构建与筛选服务；同时，基于我公司成熟的五大核心技术服务平台，成功研发了众多用于科学研究的重组蛋白、抗体、抗体药物靶点蛋白、工业酶、诊断原料等相关试剂。
- 天津
- 2025年09月25日
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卡梅德生物科技（天津）有限公司
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环七肽库筛选|多肽文库筛选
环化修饰可以赋予肽一些优势，这些优势累积起来使它们更像药物。通过环化限制肽是模拟蛋白质二级结构（例如肽环）或产生与其线性类似物相比具有增强构象稳定性的肽的常用策略。KMD生物科学构建了C7C噬菌体展示肽库，旨在构建高质量的肽环化文库。
环状噬菌体展示肽库的应用：
噬菌体展示自循环肽是发现蛋白质-蛋白质相互作用的大环抑制剂的一种有效且可扩展的方法。
环肽非常适合靶向蛋白质-蛋白质相互作用。由于其受限制的结构，环肽在结合时受益于较低的熵惩罚，并且通常表现出高亲和力和特异性。与线性肽相比，它们进一步显示出增加的稳定性和细胞渗透性。众所周知的天然产物衍生的环状化合物，如环孢菌素A，启发了该领域的研究。环状肽的基因编码文库越来越多地用于寻找环状化合物。这样的文库可以通过多种方法产生，如噬菌体展示、信使核糖核酸展示和分裂内含子环连接。双环肽噬菌体文库可以进一步通过化学交联产生。噬菌体展示得益于大的文库大小和易于实验。高度多样化的环状M13肽噬菌体展示文库可以通过设计半胱氨酸残基侧翼的随机肽序列来产生。然而，二硫键的可逆性质限制了这些循环在细胞内环境中的适用性。
在酶抑制剂中的应用。
据报道，环肽可抑制蛋白酶、磷酸酶、蛋白酶体、HIV整合酶和dam甲基转移酶。环化肽在抑制酶活性方面一直受到学术界的重视。许多小组已经研究了肽的环化以增强其抑制活性。例如，登革热病毒的NS2b-NS3蛋白酶是通过蚊子叮咬传播的严重病毒感染。目前还没有具体的治疗方法。NS2b-NS3蛋白酶是一个很好的抗病毒靶点，因为它是病毒成熟和传染性所必需的。
在核糖核酸-蛋白质相互作用抑制剂中的应用。
RNA与蛋白质的结合过程会受到环状肽的干扰。在实验室研究中，几个小组发现环肽可以破坏RNA-蛋白质相互作用的多个过程，包括：翻译起始、延伸、前mRNA剪接和病毒复制。
环七肽库构建
C7C噬菌体展示肽库基于与M13噬菌体的小外壳蛋白（pIII）融合的随机肽的组合文库。显示的肽在pIII的N末端表达，即成熟蛋白的第一个残基是第一个随机化位置。肽之后是短间隔区（Gly-Gly-Gly Ser），然后是野生型pIII序列。
环化肽更能抵抗蛋白水解，增加蛋白质渗透性，并能增强其亲和力，同时保持其选择性。这就是为什么环状肽是研究和调节蛋白质-蛋白质相互作用的一种越来越有趣的支架。
通过化学合成合成环状7聚体肽的随机寡核苷酸片段，然后将其插入噬菌体载体的外壳蛋白编码基因中，并通过基因工程重组技术转化到大肠杆菌中。增殖和产生的噬菌体表面携带外源肽，每个噬菌体表面表达一种外源肽。所有这些噬菌体构成了一个预制的环状7噬菌体展示肽库。
噬菌体展示肽库筛选：
客户提供的靶分子用于从整个预制环7噬菌体展示肽库中经过筛选、扩增和选择步骤，获得能够与靶分子高亲和力结合的单克隆抗体。通过测定该噬菌体的DNA序列，可以知道噬菌体携带的肽的氨基酸序列。富集的环肽显示出对靶蛋白的高亲和力，并且可以用作内源性蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）的抑制剂。
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文献和实验）:将外源目的DNA导入受体细胞，并能自我复制和增殖的工具。 载体具以下特征： 1)分子量小，便于携带较大的DNA片段，能进入宿主细胞并在其中增殖； 2)有多种限制酶切点，每种限制酶最好只有单一切点； 3)被切割后的载体，插入外源DNA后，不影响其复制能力，并有可选择的标记基因（如，抗药基因）。 常用的载体有：质粒，λ噬菌体，粘粒，BAC，YAC，PI等。（一）.质粒plasmid Plasmid 独立于细菌染色体外的双链环DNA分子。 常用的质粒如pUC19，多连接子MCS。插入
T7Select™ 噬菌体展示系统是Novagen开发的基于T7噬菌体(而非传统的M13)创新的基因发现研究产品。目的序列(C-端)与T7基因10 衣壳蛋白而表达得到的多肽和蛋白即可暴露(展示)与病毒(T7噬菌体)的表面。复制周期短，细胞质蛋白组装，操作和储存方便，超高克隆效率，以及T7噬菌体强大的天然特性使Novagen的T7Select成为替代传统M13系统的更好选择，用于高效文库构建和亲和淘洗。由于T7噬菌体展示系统能构建和筛查更大的文库，能使研究者更有可能发现“沧海一粟”的目标分子
酶消化该环,即可进一步克隆。但自身引导合成法较难控制反应，而且用S1 核酸酶切割发夹结构时无一例外地将导致对应于mRNA 5'端序列出现缺失和重排,因而该方法目前很少使用。 (2) 置换合成法该方法利用第一链在反转录酶作用下产生的cDNA:mRNA 杂交链不用碱变性,而是在dNTP 存在下,利用RNA 酶H 在杂交链的mRNA 链上造成切口和缺口。从而产生一系列RNA 引物,使之成为合成第二链的引物,在大肠杆菌DNA 聚合酶Ⅰ的作用下合成第二链。该反应有3 个主要优点: (1) 非常
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