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上海信裕
Hoechst 33342 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光,对细胞的毒性较低。Hoechst 33342 常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也可以用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。
本品为粉末状,用于细胞核染色时,推荐的Hoechst 33342工作浓度为0.5-10μg/ml。如需特定浓度或者经浓度优化的产品,可选购Hoechst 33342染液(1mg/ml)(Cat No.40732ES03)、Hoechst 33342染液(即用型)(Cat No. 40732ES10或Cat No. 40732ES50)。
产品性质
中文名称(Chinese Synonym)
二苯甲亚胺, 三氯化氢 2-(4-乙基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5-二-1H-苯并咪唑
英文名称(English Synonym)
2’-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride
Hoechst 33342分子式(Molecular Formula)
C27H28N6O·3HCl
分子量(Molecular Weight)
561.93
CAS号(CAS NO.)
23491-52-3
荧光光谱(Fluorescence Spectral)
Hoechst 33342的Ex/Em=346/460; Hoechst33342-核酸的Ex/Em=350/461. 荧光可用氙气灯,泵弧灯或者UV激光激发;可用DAPI滤光器、蓝色GFP滤光器、Alexa Fluor 350滤光器等检测。
纯度(Purity)
≥95%(HPLC)
结构(Structure)
Hoechst 33342运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。-20℃干燥避光保存,有效期一年。
注意事项
1) Hoechst 33342 对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2) 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3) 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
配制母液
Hoechst 33342溶于水,溶解度可达20mg/ml。充分溶解后,4℃储存。
使用方法
1. 用PBS或合适的缓冲液制备 10~50µM Hoechst33342染色液。
2. 固定的细胞或组织染色:
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33342染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33342染色。
a) 对于贴壁细胞或组织切片:加入适量Hoechst 33342染色液,覆盖住样品即可。
b) 对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
c) 吸除Hoechst 33342染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长460nm。
3. 活细胞或组织染色:
a) 细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
b) 在 37℃培养细胞 10~20 分钟。
c) 用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长460nm。
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文献和实验Isolation of Resident Cardiac Progenitor Cells by Hoechst 33342 Staining
of stem cells to efficiently efflux vital dyes such as Hoechst 33342. During fluoresence activated cell sorting (FACS) such Hoechst-extruding cells appear to the side of Hoechst-dye retaining cells and have thus been termed side population (SP) cells
1.悬浮生长的细胞在培养状态下加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml;帖壁生长的细胞用含有0.02%EDTA的0.25%胰蛋白酶消化成单细胞悬液,离心,弃上清,用1ml全培养液重悬细胞,加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml,37℃孵育7~10min。 2.4℃ 500~1000r/min离心弃去染液。 3.加入1.0ml PI染液,4℃避光染色15min。 4.400目的筛网过滤1次。 5.流式细胞仪分析。
韶光逐浅 我想问一下Hoechst凋亡染色试剂盒国产的哪个公司的好啊? yunitongxing 原装进口试剂 韶光逐浅 好的,多谢啦 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
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