Hoechst 33342

Hoechst 33342产品描述

Hoechst 33342 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光，对细胞的毒性较低。Hoechst 33342 常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也可以用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。

本品为粉末状，用于细胞核染色时，推荐的Hoechst 33342工作浓度为0.5-10μg/ml。如需特定浓度或者经浓度优化的产品，可选购Hoechst 33342染液(1mg/ml)（Cat No.40732ES03）、Hoechst 33342染液(即用型)（Cat No. 40732ES10或Cat No. 40732ES50）。

产品性质

中文名称（Chinese Synonym）

二苯甲亚胺, 三氯化氢 2-(4-乙 基 苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5-二-1H-苯并咪唑

英文名称（English Synonym）

2’-(4-Ethozkphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride

Hoechst 33342分子式（Molecular Formula）

C27H28N6O·3HCl

分子量（Molecular Weight）

561.93

CAS号（CAS NO.）

23491-52-3

荧光光谱（Fluorescence Spectral）

Hoechst 33342的Ex/Em=346/460; Hoechst33342-核酸的Ex/Em=350/461. 荧光可用氙气灯，泵弧灯或者UV激光激发；可用DAPI滤光器、蓝色GFP滤光器、Alexa Fluor 350滤光器等检测。

纯度（Purity）

≥95%（HPLC）

结构（Structure）


Hoechst 33342运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。-20℃干燥避光保存，有效期一年。

注意事项

1) Hoechst 33342 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

2) 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

3) 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

4) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

配制母液

Hoechst 33342溶于水，溶解度可达20mg/ml。充分溶解后，4℃储存。

使用方法

1. 用PBS或合适的缓冲液制备 10～50µM Hoechst33342染色液。

2. 固定的细胞或组织染色：

对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33342染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33342染色。

a) 对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst 33342染色液，覆盖住样品即可。

b) 对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。

c) 吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。

d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长460nm。

3. 活细胞或组织染色：

a) 细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。

b) 在 37℃培养细胞 10～20 分钟。

c) 用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长460nm。

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