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- 2026年03月27日
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- 服务名称：
IP&Co-IP
- 提供商：
富衡生物
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免疫沉淀 （Immunoprecipitation，IP）
服务内容 1、温和条件下进行蛋白抽提，BCA定量，调整蛋白浓度 2、样品预处理：用Protein A/G Sepharose孵育 3、样品与IP抗体进行孵育 4、洗涤Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex，并对免疫复合物进行变性处理 5、沉淀产物SDS—PAGE或者WB鉴定（目前暂无其它鉴定） 6、Western blot检测 （1） 电泳：聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）分离蛋白样品 （2） 湿法转印（BLOTING：Tank Transfer） （3） 杂交：用抗体鉴定膜上的特定蛋白（INCUBATION: Antibody） （4） 化学发光检测（ECL），胶片曝光，TotalLab Quant软件读取IOD值（可选） 7、预实验及正式实验服务 收费标准
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP） 服务内容 1、温和条件下进行蛋白抽提，BCA定量，调整蛋白浓度 2、样品预处理：用Protein A/G Sepharose孵育 3、样品与IP抗体进行孵育 4、洗涤Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex，并对免疫复合物进行变性处理 5、沉淀产物SDS—PAGE或者WB鉴定（目前暂无其它鉴定） 6、Western blot检测 （1）电泳：聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）分离蛋白样品 （2）湿法转印（BLOTING：Tank Transfer） （3）杂交：用抗体鉴定膜上的特定蛋白（INCUBATION: Antibody） （4）化学发光检测（ECL），胶片曝光，TotalLab Quant软件读取IOD值（可选） 7、预实验及正式实验服务 样品要求（样品处理及保存见附件） 1、细胞＞1×107；组织＞100mg；细菌湿重＞50mg；植物＞100mg；血清＞50ul 2、样品蛋白浓度＞1mg/ml，蛋白量＞200ug/样品 收费标准
客户提供 1、新鲜或正确保存的样品 2、目的蛋白一抗 3、阳性对照样品（尽量提供） 4、相关文献（可选） 提交物品 1、预实验曝光结果（胶片及扫描图），预实验采取2个一抗稀释度 2、正式实验曝光结果（胶片及扫描图） 3、完整实验报告 4、IOD值分析报告（可选） 对照设置 1、空白：无抗体，只有protein A/G 2、阴性对照：无蛋白，有抗体及protein A/G 3、阴性对照：未转染细胞或者基因敲除样品 4、无关空白抗体 5、蛋白裂解液上清：Input |
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文献和实验或者互作蛋白复合物（红色+黄色）洗脱 Step 5：分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验，先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照：证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白（IP）或者互作蛋白对（co-IP，比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y），即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照：用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了，固然是值得高兴
紫叶竹韵 做IP，之后Western 分析，看到有两条带，在25和50KD左右，应该是抗体的两条带，但是我的目的蛋白也是52KD的，这该怎么区分呢。 woxingwosu 最好是选择与做IP不同来源的抗体来做（比如说IP用鼠的抗体，WB就用兔的抗体），这样就不会检测到抗体的两条带。 如果没有不同来源的抗体的话，就要做IP的时候尽量少放点抗体，跑胶跑得远一点，使得目的蛋白能够被看到，不过由于你的蛋白是在是太接近重链
一、原理： 免疫共沉淀（co-immunoprecipitation，Co-IP）技术是检测蛋白质间相互作用的经典方法,基本原理是以细胞内源性靶蛋白为诱饵，将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育，促进免疫复合物的形成；随后加入能够与抗体Fc段结合的proreinA/G（预先结合固化在琼脂糖小珠上），形成“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体-proteinA/G小珠”复合物，纯化该复合物后凝胶电泳分离蛋白，应用Westernblot或者质谱技术鉴定靶蛋白的结合蛋白。 与其它研究方法相比，免疫
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