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- 上海
- 耐药细胞株构建
- 2026年10月04日
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- 服务名称：
耐药细胞株构建
- 提供商：
富衡生物
实验材料：
试剂：培养基（GIBCO），血清（CIBCO）
仪器：超净工作台、CO 2培养箱、生物倒置显微镜
实验内容与方法：
1． 体外低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击方法诱导细胞的耐药性
2． MTT法测定药物对亲本细胞和耐药细胞的IC50，计算耐药指数
实验信息（客户提供）：
1．生长状况良好的亲本细胞株，并提供细胞特性，培养条件及相关注意事项。
2．诱导剂
服务周期：6个月
结果提交：提交实验报告书（耐药指数、实验试剂与设备、实验过程、结果分析、原始数据、细胞
图片等）、耐药细胞株、亲本细胞株
收费标准：5000元/株
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文献和实验w_dennis 请教各位高人前辈，有做过基因的部分核苷酸缺失后，回补株构建实验吗？如何操作？ 请教下pBAD/gⅢ和pBR322质粒构建回补株的原理？叩谢！！:) woxingwosu 看看这个有没有帮助了： http://journal.shouxi.net/qikan/article.php?id=534304 w_dennis 谢谢，请问有pBAD/gⅢ和pBR
想长期表达某个基因，但它一高表达细胞就死、一过表达表型全是"中毒"——这时候很多老师会想到诱导表达系统： Tet 诱导稳定细胞株（Tet-On）怎么构建？和普通稳转株差在哪？诱导倍数怎么验证？ 先说结论： Tet 诱导稳转株的核心是把"表达开关"装进稳转系统：细胞先稳定表达调控蛋白（Tet-On 的 rtTA），再引入由 TRE 应答元件控制的目的基因。平时不表达或低表达，加入诱导剂（多西环素 doxycycline）后才按剂量诱导表达。构建框架仍是"感染 → 筛选 → 验证 → 冻存
想给内源基因加上荧光标签、引入点突变，或者在特定位点插入报告基因，就需要 CRISPR 敲入（Knock-In, KI）： CRISPR KI 稳定细胞株怎么构建？为什么 KI 比 KO 难、周期更长？怎么验证敲入成功？ 先说结论： KI 的核心是"Cas9 切割 + 同源重组修复（HDR）"：用 sgRNA 引导 Cas9 在特定位点切割，同时提供带同源臂的修复模板（供体），把目的序列精确整合到基因组特定位点，再经单克隆分选和 PCR+测序验证，得到基因型明确的 KI 稳转株。与 KO
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