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碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(微量酶标法)-96T

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  • ¥320
  • 万类生物
  • WLA064b
  • 2025年12月15日
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      96T

    万类生物试剂促销:试剂盒8折优惠,碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(微量酶标法)-96T 原价320元,现价256元。

    产品名称:碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(微量酶标法)试用装10T

    产品概述:
    碱性磷酸酶ALP几乎存在于身体各种组织中,是膜结合酶。肠上皮、肾小管、成骨细胞、肝脏、胎盘及白细胞中尤其丰富。血清中ALP主要来源于肝和骨。ALP与肠内脂质转移及骨质钙化有关。血清ALP测定对肝胆系统及骨骼系统疾病的研究有参考意义。
    本试剂盒可测动物血清(浆)、组织、各种体液、灌流液、各种培养细胞以及细胞培养上清液等。

    包装信息:
    图片.png

    保存日期:本试剂盒自订购之日起6月内有效。

    该产品被引用文献(仅展示部分):

    1、Zhao J; Liu Z; Chang Z, Osteogenic differentiation and calcification of human aortic smooth muscle cells is induced by the RCN2/STAT3/miR-155-5p feedback loop. Vascul Pharmacol 2020, 106821.
    PubMed: 33221530
    2、Chang Z; Yan G; Zheng J, et al., The lncRNA GAS5 Inhibits the Osteogenic Differentiation and Calcification of Human Vascular Smooth Muscle Cells. Calcif Tissue Int 2020, 107 (1), 86-95.
    PubMed: 32347320


    操作流程:
    一、样本前处理:
    1. 血清(浆):可直接取样用于测定(个别含量过高的样本需要稀释后测定,如鸡血清(浆)中ALP活力 较高,一般需要用生理盐水5倍或10倍稀释后待测)。
    2. 组织:准确称取待测组织的重量,按重量(g):体积(ml)=1:9的比例,加入9倍体积的生理盐水进行匀浆,2500rpm,离心10min,取上清液进行测定。
    3. 细胞培养液:吸取细胞培养液,1000-1500rpm,离心10min,取上清液进行测定。
    4. 培养细胞:
    a. 培养细胞的收集:
    悬浮培养细胞:可直接通过离心收集沉淀细胞(1000rpm,离心10min,弃上清留沉淀细胞)。
    贴壁培养的细胞:吸去上清,可通过细胞刮直接将细胞刮下,然后1000rpm,离心10min弃上清, 留沉淀细胞,再加入1mlPBS轻轻吹打,再次1000rpm,离心10min弃上清,留沉淀细胞待用。
    b. 培养细胞的破碎:在细胞沉淀中加入一定量(10
    8 的细胞一般加0.3-0.5ml)的缓冲液(缓冲液可以用 PBS或者是生理盐水),需保证超声探头在液面以下。功率300W,冰水浴,每3-5s超声一次,间隔4次 (每次间隔时间为30s左右)

    二、测定过程参考操作表如下:

    图片.png
    细胞(培养上清)中ALP的测定,如下操作表:
    图片.png
    三、计算公式
    1. 血清(浆)中ALP活力计算公式:
    单位定义:100ml 血清在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
    血清中ALP活力(金氏单位/100ml)= (测定OD值 - 空白OD值)/(标准OD值 - 空白OD值)x酚标准品浓度(0.1mg/ml)x 100mlx 样本测定前稀释倍数
    2. 组织样本中ALP活力计算公式:
    单位定义:每克组织蛋白在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
    组织中ALP活力(金氏单位/gprot)= (测定OD值 - 空白OD值)/(标准OD值 - 空白OD值)x 酚标准品浓度(0.1mg/ml)÷待测样本蛋白浓度(gprot/ml)
    3、培养液中ALP活力计算公式:
    单位定义:100ml 血清在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
    培养液中ALP活力(金氏单位/100ml)= (测定OD值 - 空白OD值)/(标准OD值 - 空白OD值)x酚标准品浓度(0.02mg/ml)x 100mlx 样本测定前稀释倍数
    4、培养细胞中ALP活力计算公式:
    单位定义:每克组织蛋白在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
    培养细胞中ALP活力(金氏单位/gprot)= (测定OD值 - 空白OD值)/(标准OD值 - 空白OD值)x 酚标准品浓度(0.02mg/ml)÷待测样本蛋白浓度(gprot/ml)

     

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      1、Zhao J; Liu Z; Chang Z, Osteogenic differentiation and calcification of human aortic smooth muscle cells is induced by the RCN2/STAT3/miR-155-5p feedback loop. Vascul Pharmacol 2020, 106821.
      PubMed: 33221530
      2、Chang Z; Yan G; Zheng J, et al., The lncRNA GAS5 Inhibits the Osteogenic Differentiation and Calcification of Human Vascular Smooth Muscle Cells. Calcif Tissue Int 2020, 107 (1), 86-95.
      PubMed: 32347320
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