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文献和实验亲和素和从卵白中提取的亲和素一样,也由4条相同的肽链组成。因链霉亲和素在检测应用中发生的非特异性结合远较亲和素低,因此日渐受重视,已有取代亲和素之势。 各种抗体或酶的标记物在国内已有商品供应,使用方便。BAS ELISA 具有的特点: ①对于所有的抗原抗体系统,包括免疫细胞化学、ELISA、免疫印迹法等都适用,应用范围极广; ②BAS 在温和条件下可与各类生物大分子如蛋白质、脂多糖等结合,并且这种结合对原生物大分子的生物活性无影响; ③每个亲和素分子可与 4 个生物素分子结合,所以可以偶合更多连接生物素
或亲合素。所以卵白素―生物素免疫染色系统又称为抗生物素―生物素免疫染色法。 二、几中抗生物素―生物素染色法 1.抗生物素―生物素―过氧化酶复合物技术(Avidin Biotin �Peroxidase Complex technique, 简称ABC技术) (1)基本原理:ABC法是Hsu 等于1981年在HRAB法和LAB法的基础上改良的,其特点是利用抗生物素分别连接生物素标记的第二抗体和生物素标记的酶。与LAB法和BRAB法不同的是第一抗体不为标记物所标记,生物素标记
生物发光是一种依赖于酶和底物的相互作用来产生光的化学过程。所需的酶被称为荧光素酶,底物因荧光素酶的类型而不同(如荧光素)。 常用荧光素酶信息表: 其中最有代表性的是来自萤火虫体内(Firefly)和海肾(Renilla)体内的两类萤光素酶,分别命名为萤火虫荧光素酶(FLuc)和海肾荧光素酶(RLuc),同时近年来研究得较多的是来源于高斯氏菌的高斯荧光素酶(GLuc)。 萤火虫荧光素酶(FLuc)作为最通用和最常见的报告基因,该蛋白质不需要翻译后修饰即可获得酶活性,可用于原核和真核细胞。FLuc
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