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SHuffle™ T7 lysY E.coli 感受态细胞

SHuffle™ T7 lysY Competent E. coli
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    ■  可用于表达毒性蛋白
    ■  有助于细胞质中蛋白质二硫键的折叠
    ■  T7 表达
    ■  K12 菌株
    ■  无动物来源产品
    ■  抗 T1 噬菌体感染（fhuA2）


    概述
    适用于亚克隆转化和蛋白表达。


    基因型
    MiniF lysY (CamR ) / Δ(ara-leu)7697 araD139fhuA2 lacZ::T7 gene1 Δ(phoA)Pvull phoR ahpC* galE(or U) galK λatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR , laclq ) ΔtrxBrpsL150(StrR ) Δgor Δ(malF)3


    特性
    • 促进细胞质中二硫键形成的工程化 E.coli K12 菌株
    • 组成型表达单染色体拷贝二硫键异构酶 DsbC
    • DsbC 能够促进错误折叠的二硫键形成正确的构象（1，2）
    • 细胞质中的 DsbC 也是一种分子伴侣，能够帮助无二硫键的蛋白折叠形成正确构象（3）
    • BL21 源增强型菌株
    • 表达单染色体拷贝的 T7 RNAP
    • 含有自 mini F 的溶菌酶突变体（缺少酰胺酶活性）
    • 可用于表达毒性蛋白
    • 无需氯霉素


    转化效率
    1×106 cfu/μg pUC 19 DNA
    未被转化的细胞需要检测抗 Φ80 噬菌体的感染的能力，这是检验抗 T1 噬菌体感染能力的标准检测法。此外，未转化细胞还要检测其抗链霉素抗性以及对氨苄青霉素、卡拉霉素和四环素的敏感性。细胞对氯霉素、链霉素和壮观霉素有抗性。


    注意事项
    感受态细胞应贮存于 –80°C，不能反复冻融。 –20°C 保存会显著降低转化效率。只要温度超过–80°C，即使没有融化，细胞转化效率也会降低为零。


    参考文献
    (1) Bessette, P.H. et al. (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. USA ,96, 13703–13708.
    (2) Levy, R. et al. (2001) Protein Expr. Purif., 23,338–347.
    (3) Chen, J. et al. (1999) J. Biol. Chem ., 274, 19601–19605.


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