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ProtoScript AMV LongAMP Taq RT

-PCR 试剂盒
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    Oligo d(T)23VN*
    #S1327S 1.0 A260 unit . . . . . ¥919
    *注意: V = A，G 或 C，N = A，G，C 或T


    ♦ mRNA 半定量表达分析
    ♦ RNA 起始的克隆
    ♦ 以高产量合成各种 RT-PCR 产物


    概述
    ProtoScript® AMV LongAmp™ Taq RT-PCR 试剂盒含两种强大的混合液，AMV 酶混合液和 LongAmpTaq 2X Master Mix，可用于两步法的 RT-PCR 实验。这两种混合试剂使反应启动时所需的操作最少化，而不影响 RT-PCR 反应的重复性和超强性。
    使用 AMV 酶混合液合成 cDNA 第一链时，最佳反应温度范围广，可以从 37 ℃ 到 50 ℃。LongAmp Taq 2X Master Mix 能够使长度超过14 kb 的 cDNA 产物被重复有效扩增。试剂盒还含有 d(T)23 VN 引物及作为信使 RNA polyA 端的锚定引物。随机引物混合液是六碱基引物与 d(T)23 VN 引物的优化混合，能覆盖整个 RNA 模板。
     


    ProtoScript AMV LongAmp Taq RT-PCR试剂盒组成
    ♦ AMV 酶混合液
    ♦ AMV 2X 反应混合液
    ♦ Oligo d(T)23VN 引物（50 μM）**
    ♦ 随机引物混合液（40 μM）**
    ♦ LongAmp Taq 2X Master Mix
    ♦ 无核酸酶污染的水
    ** Oligo-d(T)23VN 和随机引物混合液含有 1 mM dNTP


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    • PCR和RT-PCR

      。全长cDNA使用在碱性琼脂糖胶上将大小分类的条带切除并计数的方法分析。      图4 逆转录酶对RT-PCR灵敏度的影响   图5 逆转录酶对长模板RT-PCR灵敏度的影响 以oligo(dT)为引物，使用ThermoScriptⅡ或AMV，在50℃下由Hela细胞总RNA合成cDNA。使用Platinum® Taq DNA聚合酶和人DNA聚合酶ε引物进行35个循环。   人tuberous scherosis ⅡmRNA（5.3kb

    • 【转帖】怎样选出最合适的Taq酶

      物，也不用担心抑制不稳定，使用起来方便、高效。此外，由于几乎所有的Taq酶产品都带有相应的反应缓冲液，缓冲液的品质也对保证Taq酶特异性扩增起着不可忽视的作用，一般的缓冲液中调节H键作用的盐只有KCl，QIAGEN公司的缓冲体系通过KCl、(NH4)SO4盐离子体系的平衡调节也提高了酶作用的特异性。 此外，热启动的Taq酶也是实现一步法RT-PCR的基础。如QIAGEN公司的OneStep RT-PCR试剂盒，在RT反应较低温度下，Taq酶没有活性，逆转录酶发挥活性；RT反应结束，高温灭活逆转

    • 【共享】怎样选出最合适的Taq酶

      系列，无需别的辅助抑制物，也不用担心抑制不稳定，使用起来方便、高效。此外，由于几乎所有的Taq酶产品都带有相应的反应缓冲液，缓冲液的品质也对保证Taq酶特异性扩增起着不可忽视的作用，一般的缓冲液中调节H键作用的盐只有KCl，QIAGEN公司的缓冲体系通过KCl、(NH4)SO4盐离子体系的平衡调节也提高了酶作用的特异性。此外，热启动的Taq酶也是实现一步法RT-PCR的基础。如QIAGEN公司的OneStep RT-PCR试剂盒，在RT反应较低温度下，Taq酶没有活性，逆转录酶发挥活性；RT反应

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