相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 注册证号:
详见说明书
- 保存条件:
在-20℃或-80℃可长期保存
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次说明书
- 库存:
54
- 供应商:
上海一研
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次说明书详细介绍:
两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次说明书技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次说明书操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
5-trans U-46619 (1 mg) 9,11-dideoxy-9。alpha。,11。alpha。-methanoepoxy-prosta-5E,13E-dien-1-oic acid; 5,6-trans U-46619; 5-trans U-46619
15(S)-Fluprostenol (10 mg) 9α,11α,15S-trihydroxy-16-(3-(trifluoromethyl)phenoxy)-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15(S)-Fluprostenol
YM-53601 (1 mg) 2-[(2E)-2-(1-azabicyclo[2。2。2]oct-3-ylidene)-2-fluoroethoxy]-9H-carbazole, monohydrochloride; YM-53601
Leukotriene B4 (100 ug) 5S,12R-dihydroxy-6Z,8E,10E,14Z-eicosatetraenoic acid; LTB4; Leukotriene B4
11-dehydro Thromboxane B2-d4 (100 ug) 9。alpha。,15S-dihydroxy-11-oxothromba-5Z,13E-dien-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; 11-keto TXB2-d4; 11-dehydro Thromboxane B2-d4
5(S),15(S)-DiHETE (25 ug) 5S,15S-dihydroxy-6E,8Z,10Z,13E-eicosatetraenoic acid; 5(S),15(S)-DiHETE
Precoated (Mouse Anti-Rabbit IgG) EIA 96-Well Solid Plate (5 ea) Precoated (Mouse Anti-Rabbit IgG) EIA 96-Well Solid Plate
Corticosterone EIA Antiserum (500 dtn) Corticosterone EIA Antiserum
15(S)-HpEPE (50 ug) 15S-hydroperoxy-5Z,8Z,11Z,13E,17Z-eicosapentaenoic acid; 15(S)-HpEPE
9(S)-HpODE (1 mg) 9S-hydroperoxy-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9(S)-HpODE
HEPES Stock Solution (1 M) (500 mL) HEPES Stock Solution (1 M)
PAF C-16 (50 mg) 1-O-hexadecyl-2-O-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; Platelet-activating Factor C-16; PAF C-16
2-Linoleoyl Glycerol (5 mg) 9Z,12Z-octadecadienoic acid, 2-glyceryl ester; 2-LG; 2-Linoleoyl Glycerol
PtdIns-(5)-P1 (1,2-dipalmitoyl) (ammonium salt) (1 mg) 1-(1,2-dihexadecanoylphosphatidyl)inositol-5-phosphate, diammonium salt; DPPI-5-P1; PtdIns-(5)-P1 (1,2-dipalmitoyl) (ammonium salt)
Uric Acid Standard (1 ea) Uric Acid Standard
Sucrose Developing Enzyme (1 ea) Sucrose Developing Enzyme
TMPD (hydrochloride) (5 g) N,N,N’,N’-tetramethyl-1,4-benzenediamine, dihydrochloride; Wurster’s Reagent|N,N,N’,N’-Tetramethyl-p-Phenylenediamine; TMPD (hydrochloride)
U-75302 (100 ug) 6-(6-(3R-hydroxy-1E,5Z-undecadien-1-yl)-2-pyridinyl)-1,5S-hexanediol; U-75302
T0901317 (5 mg) N-(2,2,2-trifluoroethyl)-N-[4-[2,2,2-trifluoro-1-hydroxy-1-(trifluoromethyl)ethyl]phenyl]-benzenesulfonamide; T0901317人吡啶酚(PYD)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人鼻咽癌病毒(NPCV)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人鼻咽癌(NPC)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人鼻病毒(RhV)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人苯并吡-DNA(PAH-DNA)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人诺龙/去(NP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人氨(LPA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人本周(BJP) ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人保护素(CD59)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人胞浆免疫球(CIg)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次说明书人包虫抗体IgG ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人膀胱肿瘤抗原(BTA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人膀胱癌抗原(UBC)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人伴侣10(CPN10)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人半乳糖6硫酯酶(Gal-6S)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人半乳甘露聚糖(GM)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人半胱氨酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人瘢痕性天疱疮抗体(CP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人百日咳毒素(PT)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次说明书公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验。全长cDNA使用在碱性琼脂糖胶上将大小分类的条带切除并计数的方法分析。 图4 逆转录酶对RT-PCR灵敏度的影响 图5 逆转录酶对长模板RT-PCR灵敏度的影响 以oligo(dT)为引物,使用ThermoScriptⅡ或AMV,在50℃下由Hela细胞总RNA合成cDNA。使用Platinum® Taq DNA聚合酶和人DNA聚合酶ε引物进行35个循环。 人tuberous scherosis ⅡmRNA(5.3kb
This is a protocol from Engelke et.al.(1990)which was modified by Dr.Baron.The enzyme has been used for RT-PCR,genotyping and cloning.Solutions1000X IPTG0.5M IPTG 1.19g IPTGup to 10 ml wih sterile Qfilter and store at -20℃Buffer A50 mM Tris 7.9 25
性由两个人工合成的引物序列决定。反应分三步: A.变性:通过加热使 DNA 双螺旋的氢键断裂,形成单链 DNA; B.退火:将反应混合液冷却至某一温度,使引物与模板结合。 C.延伸:在 DNA 聚合酶和 dNTPs 及 Mg2+存在下,退火引物沿 5‘ —— 3’ 方向延伸。 以上三步为一个循环,如此反复。 3. 逆转录酶和 RT-PCR 逆转录酶(reverse transcriptase)是存在于 RNA 病毒体内的依赖 RNA 的 DNA 聚合酶,至少具有以下三种活性: (1)依赖 RNA
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










