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这些细胞是专为获取最大电穿孔效率而开发的。所有EP-Max 10B E.coli 菌株都以方便的0.1 ml 体积提供,确
保质量和性能的稳定性。转化中,只需简单地解冻细胞,加入DNA 并转移至电击杯。使用Bio-Rad 的MicroPulserTM
或Gene Pulser XcellTM 系统以确保一致的电转化条件。
功能灵活的EP-Max10B 和EP-Max10B F' 基因
型可适合许多应用,极高的转化效率使它们成为构
建基因组文库或cDNA 文库的理想选择。另外,由
于EP-Max10B F' 可被M13 噬菌体感染,它可用于
生产ssDNA。采用lacIq 阻抑基因进行表达调控。
也提供带tonA 标记的EP-Max 细胞,使之可以
抗噬菌体感染。EP-Max10B T1 抗性细胞同时抗T1
和T5 噬菌体感染,为你的基因组文库和cDNA 文
库提供了更多的安全性。
更多信息,请索取资料# 2871和# 2873。
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文献和实验体外连接的DNA重组分子导入合适的受体细胞才能大量增殖。为了提高受体菌摄取外源DNA的能力,提高转化效率以获得更多的转化子,人们摸索出了不同的方法处理细菌,使其处于感受态。目前主要采用电转化法和CaCl2法将外源DNA导入受体细胞中,并需要相应地制备电转化感受态细胞和CaCl2感受态细胞。实验目的:学习感受态细胞的制备过程实验材料:大肠杆菌菌株DH5a或DH10B实验原理:电转化法是利用瞬间高压在细胞上打孔,因而需用冰冷的超纯水多次洗涤处于对数生长前期的细胞,以使细胞悬浮液中应含有尽量少的导电
聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)分离血清蛋白质(核黄素-TEMED聚合系统)(图)
酰胺的百分浓度,T为二个单体总的百分浓度。 用于研究大分子核酸的凝胶多为大孔径凝胶,太软,不易操作,最好加入0.5%琼脂糖。有的在3%凝胶中加20%蔗糖,也可增加机械强度而又不影响孔径大小。 (三)几种染料的性能及染色原理 1.氨基黑10B(amino black 10B) C22H13O12N6S3Na3 MW=715,λmax=620~630nm。氨基黑是酸性染料,其磺酸基与蛋白质反应构成复合盐。是最常用的蛋白质染料。但用氨基黑染SDS-蛋白质时效果不好。另外,氨基黑染不同蛋白
一、CaCl2 感受态细胞的制备的实验步骤 1.前夜接种受体菌( DH5α或 DH10B),挑取单菌落于LB培养基中37℃摇床培养过夜(约16小时); 2.取 1ml过夜培养物转接于100ml LB培养基中,在37℃摇床上剧烈振荡培养约2.5-3小时(250-300rpm); 3.将 0.1M CaCl2 溶液置于冰上预冷; 以下步骤需在超净工作台和冰上操作 4.吸取 1.5ml培养好的菌液至1.5ml离心管中,在冰上冷却10分钟; 5.
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