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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Tuner(DE3)感受态细胞
- 保质期:
三年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
低温保存
- 规格:
10×100ul / 20×100ul
| 编号 | 名称 | 规格 | 单位 |
| YB25-100S | Tuner(DE3)感受态细胞 |
10*100ul | |
| YB25-100 | Tuner(DE3)感受态细胞 |
20*100ul |
Tuner(DE3)Chemically Competent Cell 产品说明书
Tuner(DE3)感受态细胞产品规格
Tuner(DE3): 10×100μl
pUC19(control vector):10pg/μl 10μl
保存条件:-80℃
Tuner(DE3)感受态细胞基因型
F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm lacY1 (DE3)
Tuner(DE3)感受态细胞产品说明
Tuner(DE3)菌株是BL21菌株的 lacZY基因(半乳糖苷透性酶基因)突变株,此突变导致IPTG以均一速度进入体系中大肠杆菌的每个细胞,产生更加严格、均一的浓度依赖。此菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶,该区整合于Tuner的染色体上,所以称为Tuner(DE3) ,可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。High5TM系列Tuner(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率达107cfu/μg。
Tuner(DE3)感受态细胞操作方法
1. 取100μl冰上融化的Tuner(DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
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文献和实验摘要: 本文主要介绍了各种感受态细胞的区别、用途和特征. Xl1-Blue菌株 基因型: endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F'[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+).
菌等,前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出,而后者细胞内本就没有甲基化酶,从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。 E.coli JM110 要排除dam,dcm甲基化的影响,需要用特定的dam-,dcm-的菌株,如JM110 如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒,则不会被甲基化. 各种感受态细胞的区别 用途 特征
( DE3 )表达的活性蛋白比其它宿主菌高 10 倍以上。 Origami 宿主菌与氨苄抗性质粒相容,可用于 pET-32 载体,硫氧还蛋白标签能够进一步增强在胞浆内形成二硫键。 TrxB 和 gor 突变可分别用卡那霉素和四环素选择,因此该菌株建议用于带氨苄抗性标记 bla 的 pET 质粒。 Origami B 宿主菌来源于 BL21 lacZY 突变株,还带有与原始 Origami 菌株相同的 TrxB / gor 突变。 Origami B 菌株集 BL21 、 Tuner
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