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A型产气荚膜梭菌α毒素放免试剂盒说明书

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  • YB-10271
  • 2025年07月16日
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      钰博生物

    • 检测范围

      见说明书

    • 检测方法

      酶联免疫

    • 应用

      科研

    • 标记物

      见说明书

    • 样本

      血清/组织/尿液

    A型产气荚膜梭菌α毒素放免试剂盒说明书
    CPA(HY-10271) RIA KIT

    产气荚膜梭菌α毒素(Clostridium perfringens α-toxin, CPA),是A型产气荚膜梭菌的主要毒素,又是最重要的致病因子。α 毒素是一种由370 个氨基酸组成的单链多肽。分子量为42.58KD。它也是一种依赖于锌离子的多功能性金属酶。它具有磷脂酶活性,能够水解卵磷脂形成磷酸胆碱和甘油二酯,是引起生物体组织病理变化的主要因素。它能在动物上引起坏死性肠炎、仔猪的坏死性肠炎和牛的出血性小肠炎。检测A型产气荚膜梭菌α毒素是判定食品安全和动物疾病的一个重要指标。
    反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的CPA和加入的125I –CPA(标记的CPA抗原:产生荚膜α毒素为应用基因工程技术,以噬菌体为载体表达的产物,纯度大于98%)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –CPA(标记的CPA抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的CPA的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中CPA的含量。

    A型产气荚膜梭菌α毒素放免试剂盒说明书该药盒主要应用范围:
     动物坏死性肠炎
     消化系统疾病
    药盒组成:(常温运输,4℃保存)
    1. CPA 缓冲液1瓶
    2. CPA(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
    3. CPA标准品6瓶,浓度为2、4、8、16、32、64、128pg/ml
    4. CPA抗体 1瓶。
    5. 125I –CPA 1瓶
    标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
    测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
    CPA RIA加液程序 (单位: ul )
    ————————————————————————————
    试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
    ————————————————————————————
    缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
    标 准 品 —— —— —— 100 ——
    样 品 —— —— —— —— 100
    抗 体 —— —— 100 100 100
    125I-CPA 100 100 100 100 100
    ————————————————————————————
    摇匀4℃ 放置24小时
    ————————————————————————————
    分 离 剂 —— 500 500 500 500
    ————————————————————————————
    混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。

    A型产气荚膜梭菌α毒素放免试剂盒说明书 结果计算:
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
    注意事项:
    本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释
    本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
    本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解
    本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
    本试剂盒主要技术指标:
    1、 NSB:<7%。
    2、 灵敏度:<0.2pg/ml
    3、 标准曲线范围:2-128pg/ml
    4、 批内变异系数:CVw<7.2%;
    批间变异系数:CVw <8.9% 。
    5、 正常参考值:正常值<4 pg/ml
    阴性小于4pg/ml 阳性大于6pg/m 各实验室建立自己的正常值l
    本月药盒参考数据:
    —————————————————————————————————————————
    T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
    —————————————————————————————————————————
    CPM
    —————————————————————————————————————————
    N/T% B0/T% B/ B0 %
    —————————————————————————————————————————

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    • 微生物检验:产气荚膜梭菌致病物质及所致疾病简介

      1.致病物质 产气荚膜梭菌能产生10余种外毒素,有些外毒素即为胞外酶。4种主要毒素中,α毒素(卵磷脂酶)毒性最强,各菌型均能产生,在气性坏疽的形成中起主要作用。此外,很多A型菌株还能产生肠毒素,引起食物中毒。 2.所致疾病 气性坏疽、食物中毒、坏死性肠炎。

    • 厌氧性细菌:厌氧芽胞杆菌

      、θ、ι、κ、λ、μ、ν等12种,和具有毒性作用的多种酶,如卵磷脂酶、纤维蛋白酶、透明质酸酶、胶原酶和DNA酶等,构成强大的侵袭力。根据细菌产生外毒素的种类差别,可将产气荚膜梭菌分成A、B、C、D、E5个型。对人致病的主要是A型,引起气性坏疽和食物中毒。C型则引起坏死性肠炎。在各种毒素和酶中,以α毒素最为重要,α毒素是一种卵磷脂酶,能分解卵磷脂,人和动物的细胞膜是磷脂和蛋白质的复合物,可被卵磷脂酶所破坏,故α毒素能损伤多种细胞的细胞膜,引起溶血、组织坏死,血管内皮细胞损伤,使血管通透性增高,造成

    •  厌氧性细菌

      一般不侵入血流,局部细菌繁殖产生的各种毒素以及组织坏死产生的毒性物质被吸收入血,引起毒血症而死。   2.食物中毒   某些A型菌株能产生肠毒素,食其污染的食物后,可引起食物中毒。潜伏期短,约8~22小时,发生腹痛、腹泻、便血等症状,较少呕吐,一般不发热,1~2日内可自愈。中毒机理类似霍乱肠毒素,激活小肠粘膜细胞的腺苷酸环化酶,导致cAMP浓度增高,使肠粘膜分泌增加,肠腔大量积液,引起腹泻。   3.急性坏死性肠炎   由C型产气荚膜梭菌引起,致病物质可能

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