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上海沪震
CPA(HY-10271) RIA KIT
产气荚膜梭菌α毒素(Clostridium perfringens α-toxin, CPA),是A型产气荚膜梭菌的主要毒素,又是最重要的致病因子。α 毒素是一种由370 个氨基酸组成的单链多肽。分子量为42.58KD。它也是一种依赖于锌离子的多功能性金属酶。它具有磷脂酶活性,能够水解卵磷脂形成磷酸胆碱和甘油二酯,是引起生物体组织病理变化的主要因素。它能在动物上引起坏死性肠炎、仔猪的坏死性肠炎和牛的出血性小肠炎。检测A型产气荚膜梭菌α毒素是判定食品安全和动物疾病的一个重要指标。
A型产气荚膜梭菌α毒素放免试剂盒说明书反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的CPA和加入的125I –CPA(标记的CPA抗原:产生荚膜α毒素为应用基因工程技术,以噬菌体为载体表达的产物,纯度大于98%)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –CPA(标记的CPA抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的CPA的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中CPA的含量。
该药盒主要应用范围:
动物坏死性肠炎
消化系统疾病
A型产气荚膜梭菌α毒素放免试剂盒说明书药盒组成:(常温运输,4℃保存)
1. CPA 缓冲液1瓶
2. CPA(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
3. CPA标准品6瓶,浓度为2、4、8、16、32、64、128pg/ml
4. CPA抗体 1瓶。
5. 125I –CPA 1瓶
标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
A型产气荚膜梭菌α毒素放免试剂盒说明书测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
CPA RIA加液程序 (单位: ul )
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试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I-CPA 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放置24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
注意事项:
本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
本试剂盒主要技术指标:
1、 NSB:<7%。
2、 灵敏度:<0.2pg/ml
3、 标准曲线范围:2-128pg/ml
4、 批内变异系数:CVw<7.2%;
批间变异系数:CVw <8.9% 。
5、 正常参考值:正常值<4 pg/ml
阴性小于4pg/ml 阳性大于6pg/m 各实验室建立自己的正常值l
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
—————————————————————————————————————————中文名称:人白介素1β转换酶(ICE)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human Interleukin 1β converting enzyme,ICE ELISAkit
中文名称:人整合素连接激酶1(ILK-1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human integrin-linked kinase 1,ILK-1 ELISAkit
中文名称:人细胞色素P450c21B/21-羟化酶(CYP21B)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase,CYP21B ELISAkit
中文名称:人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase,CYP21A ELISAkit
中文名称:人末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT ELISAkit
中文名称:人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO ELISAkit
中文名称:人丝氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human serine protease,PRSS ELISAkit
中文名称:人脾脏酪氨酸激酶(Syk)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human spleen tyrosine kinase,Syk ELISAkit
中文名称:人丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human serine/threonine protein kinase,STK ELISAkit
中文名称:人白介素受体相关激酶(IRAK)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human interleukin receptor associated kinase,IRAK ELISAkit
中文名称:人尿激酶(UK)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human urokinase,UK ELISAkit
中文名称:人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human phosphoenolpyruvate carboxykinase,PCK ELISAkit
中文名称:人胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human trypsin ELISAkit
中文名称:人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human β-site APP-Cleaving Enzyme 1,1BACE1 ELISAkit
中文名称:人蛋白二硫化物异构酶前体(PDI)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human Protein disulfide-isomerase precursor,PDI ELISAkit
中文名称:人蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human protein disulfide-isomerase A3,PDIA3 ELISAkit
中文名称:人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISAkit
中文名称:人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase,PPI ELISAkit
中文名称:人鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human ornithine carbamoyl transferase,OCT ELISAkit
中文名称:人内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human Visceral adipose-specific serine protease
中文名称:人蛋白磷酸酶(PP)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human Protein Phosphatase,PP ELISAkit
中文名称:人硫氧还蛋白还原酶(TrxR)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human thioredoxin reductase,TrxR ELISAkit
中文名称:人白细胞弹性蛋白酶(HLE)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human leukocyte exastase,HLE ELISAkit
中文名称:人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human Elastase ELISAkit
中文名称:人α淀粉酶(AMS/AMY)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human α-Amylase,AMS/AMY ELISAkit
中文名称:人碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human alkaline phosphatase,ALP ELISAkit
中文名称:人天青杀素(AZU)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human azurocidin,AZU ELISAkit
中文名称:人血管紧张肽酶A(ATA)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human Angiotensinase A,ATA ELISAkit
中文名称:人胰淀粉酶(PAMY)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human Pancreatic Amylase,PAMY ELISAkit
中文名称:人α烯醇化酶(αENOL)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human α-enolase,αENOL ELISAkit
中文名称:人胶原酶II(Collagenase II)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称:Human Collagenase Type II ELISAkit
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文献和实验1.致病物质 产气荚膜梭菌能产生10余种外毒素,有些外毒素即为胞外酶。4种主要毒素中,α毒素(卵磷脂酶)毒性最强,各菌型均能产生,在气性坏疽的形成中起主要作用。此外,很多A型菌株还能产生肠毒素,引起食物中毒。 2.所致疾病 气性坏疽、食物中毒、坏死性肠炎。
、θ、ι、κ、λ、μ、ν等12种,和具有毒性作用的多种酶,如卵磷脂酶、纤维蛋白酶、透明质酸酶、胶原酶和DNA酶等,构成强大的侵袭力。根据细菌产生外毒素的种类差别,可将产气荚膜梭菌分成A、B、C、D、E5个型。对人致病的主要是A型,引起气性坏疽和食物中毒。C型则引起坏死性肠炎。在各种毒素和酶中,以α毒素最为重要,α毒素是一种卵磷脂酶,能分解卵磷脂,人和动物的细胞膜是磷脂和蛋白质的复合物,可被卵磷脂酶所破坏,故α毒素能损伤多种细胞的细胞膜,引起溶血、组织坏死,血管内皮细胞损伤,使血管通透性增高,造成
一般不侵入血流,局部细菌繁殖产生的各种毒素以及组织坏死产生的毒性物质被吸收入血,引起毒血症而死。 2.食物中毒 某些A型菌株能产生肠毒素,食其污染的食物后,可引起食物中毒。潜伏期短,约8~22小时,发生腹痛、腹泻、便血等症状,较少呕吐,一般不发热,1~2日内可自愈。中毒机理类似霍乱肠毒素,激活小肠粘膜细胞的腺苷酸环化酶,导致cAMP浓度增高,使肠粘膜分泌增加,肠腔大量积液,引起腹泻。 3.急性坏死性肠炎 由C型产气荚膜梭菌引起,致病物质可能
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