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- Invitrogen™
- 美国
- A46626
- 2025年07月12日
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GeneArt™ Gibson Assembly HiFi 克隆试剂盒，含电转感受态细胞
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嵘崴达
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10 reactions
GeneArt™ Gibson Assembly HiFi 克隆试剂盒，含电转感受态细胞
货号: A46626
GeneArt Gibson Assembly HiFi 克隆试剂盒可通过一种技术进行 DNA 组装和克隆，该技术可使多个重叠的 DNA 片段在 15–60 分钟的一步等温反应中无缝连接。不同长度的 DNA 片段可通过片段间互补的重叠序列均匀组装。这种方法的内在灵活性适用于小型和大型 DNA 构建体，包括单个插入片段和多个插入片段。所得产物可用于多种下游应用，包括转化、PCR 和滚环扩增（RCA）。GeneArt Gibson Assembly HiFi 克隆试剂盒（含电转感受态细胞）是包括预混液、阳性对照，水和 ElectroMAX DH10B 电转感受态大肠杆菌的全套试剂盒。
GeneArt Gibson Assembly HiFi 克隆试剂盒的特点包括：
•简便—在单次反应中可无缝组装和克隆多达 6 个 DNA 片段
•高效—高保真度可提供比其他方法更多的正确克隆
•灵活—设计指南可将其组装到您选择的任何载体中
•便利—可提供预混液试剂盒和配有化学或电转感受态细胞的克隆试剂盒
•可靠—超过 4000 篇科学文献引用体现了该方法的巨大成功
多片段的无缝组装
GeneArt Gibson Assembly HiFi 克隆是一个简单的一步法过程，可通过专有的酶混合物将具有共享末端同源序列的多达 6 个 DNA 片段组装起来，而不会留下任何冗余序列或疤痕（无缝）。孵育 15–60 分钟后，将一部分组装反应物转化至化学感受态或电转感受态细胞，产生可用于次日分析的克隆。所需的 20 到 40 个碱基对具有末端同源性的片段可通过设计从头合成，或可通过使用定制 DNA 寡核苷酸的 PCR 扩增轻松获得。这种特殊的酶混合物可产生无缝且共价结合的高效率 DNA 构建体。
可提供极高效率的可靠方法
由于共价结合的最终产物，GeneArt Gibson Assembly HiFi 方法可以利用化学感受态细胞或电转感受态细胞获得极高的转化效率，从而提高筛选正确克隆的成功率，尤其是对于具有高挑战性的构建体。无需限制性内切酶、连接或重组位点，并且该方法可提供完美的无缝构建体，而没有不需要的冗余碱基。
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文献和实验飞的 GeneArt™ Gibson Assembly® 克隆试剂盒系列为例，Gibson Assembly 实际上是生命科学狂人文特尔（就是那个敢单挑 6 国合力的国际人类基因组计划还占尽上风，逼得当时美国总统出面协调让双方合作并同时发表结果的）东山再起后成立的 Venter 研究所旗下 Gibson 博士开发的，里面包含了精心优化搭配的三种酶活性：外切酶会外切双链末端而产生单链 3’突出端，使得外源片段和线性化载体的互补末端能够退火，聚合酶活性会填补退火片段产生的缺口，连接酶活性能够在重组后进行连接。得到
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