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SEEBIO
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Glutamyl-3-carboxy-4-nitranilide (GlupaC)
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文献和实验测定的局限性及干扰因素 1.本法具有较好的灵敏度和准确性,先后作为AACC和SSCC的推荐方法,该底物的溶解度小,难以达到酶动力学反应的最适浓度,只能采用较低的基质浓度;甘氨酸对GGT的反应有抑制作用,所用的双甘肽制剂中不应含有甘氨酸; 2.试剂中的游离对硝基苯胺和其他不纯的物质对酶活性有抑制作用,可用吡啶抽提不纯物质,如果试剂空白过高,底物应该重新结晶; 3.甘氨酸对GGT的反应有抑制作用,所用的双甘肽制剂中不应含有甘氨酸; 质量控制 每批
。又如测醛缩酶时,其底物醛类化合物可以和NAD+起非酶反应产生一种具有类似NADH吸收光谱的化合物,给测定带来困难。(四)分析容器的污染如冲洗不当,分析容器和管道中混杂有各种物质,可能影响酶活性,如微量重金属可使酶失活,残留的表面活性剂可能抑制酶活性。(五)沉淀形成使用光学法监测酶反应时,如有沉淀形成或组织匀浆中颗粒的下沉都会引起吸光度变化,引起测定结果误差,此情况常见于底物溶解度低而反应体系中底物浓度偏高。可见于用γ-谷氨酰对硝基苯胺为底物测GGT时。
首尾相连环肽(Head-to-tail)、侧链和侧链相连环肽(Sidechain-to-sidechain)、侧链和端基相连环肽(Sidechain-to-end)、含二硫桥的环肽(Disufide-bridge)、以及含有其他桥连结构的环肽。从合成方法上讲,首尾相连的环肽的合成难度最大。因为环肽的前体-直链肽的肽键具有很强的p键特征,分子更偏爱形成反式构象,呈舒展状态,造成属于反应中心的端基的羧基和氨基在空间上距离较远,不利于发生分子内缩合反应,有利于分子间缩合。首尾相连的环肽通常是N端和C端游离的直链肽在稀溶液
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