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- 文献和实验
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低温
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2年
- 英文名:
北诺
- 库存:
1000
- 供应商:
北诺
BL21 Plyss(DE3)
BL21Condon Plus (DE3)
TB1(DE3)
C41(DE3)
C43(DE4)
Rosetta(DE3)
Origami B (DE3)
Rosetta-gami-B(DE3)
Rosetta-gami(DE3)Plyss
DH5α
Top10
Top10F'
JM109(DE3)
TG1
Xl1-Blue
X10-Gold
HB101
DH10Bac
STBL3菌
BJ5183细菌
PGEX4T-1
PGEX4T-2
PGEX4T-3
PGEX-6P-1
PGEX-KG(不完整)
PET3b
PET5b
PET11a
PET15b
PET20b
PET21b
PET22b
PET24a
PET25b
PET26b
PET27b
PET28a
PET28b
PET30a
PET31a
PET32a
PET35
PET41a
PET43.1
PET50b
PET52b
PET302
PET303
PET-Dsba
PET-GST
PET-His
PET-Trx
PDsred2-ER
PET32a-DsRed2
PET41a-DsRed2
PGEX4T-1-DsRed2
pEGFP-N1
PLPP-STII
PLLP-OmpA
PTrc-CKS
Pmal-c2x
Pmal-p5x
PMBP-C
PMBP-P
PUC19
PET28a-sumo
PET-duet
pACYCDuet-1
pRSFDUET-1
pproexhta
pproexhtB
PcoldI
PcoldI-sumo
PBV220
求交换各种人源基因
PEGFP-N1
PGL-4.15
PRL-TK
PRL-SV40
PCDNA3.1+/(-)
大肠菌株DH5α
大肠菌株JM109
大肠菌株DH10B
大肠菌株BL21(DE3)
pBV220
pET26b
pET30a
pET5b
Rosetta-gami-B(DE3)
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文献和实验)按 Novagen公司《pET System Manual》提供方法反复处理,洗涤包涵体。包涵体按培养菌100×OD600/3 ul体积加1% SDS溶解,加等体积2×SB,进行12% SDS-PAGE电泳分析,进行蛋白条带灰度扫描,计算融合蛋白Trx-PrPC27-30占细菌总蛋白的相对含量。 1.2.7重组融合蛋白的纯化 PrP-pET-32a(+)转化表达菌E.coli BL21(DE3),TB培养基中,25℃,AMP 200 ug/ml,摇床(250 r/min)培养至OD600约为1.5,更换
。 1.2.7重组融合蛋白的纯化 PrP-pET-32a(+)转化表达菌E.coli BL21(DE3),TB培养基中,25℃,AMP 200 ug/ml,摇床(250 r/min)培养至OD600约为1.5,更换等体积新鲜TB培养基,加入IPTG至终浓度1 mM,AMP 200 ug/ml,25℃,4 h,4000 g离心收集菌体。按 Ni-NTA HiBind Purification Kit使用说明溶解包涵体,纯化融合蛋白。 或使用笔者改进方法,将Ni-NTA HiBind
,洗涤包涵体。包涵体按培养菌100×OD600/3 ul体积加1% SDS溶解,加等体积2×SB,进行12% SDS-PAGE电泳分析,进行蛋白条带灰度扫描,计算融合蛋白Trx-PrPC27-30占细菌总蛋白的相对含量。 1.2.7重组融合蛋白的纯化 PrP-pET-32a(+)转化表达菌E.coli BL21(DE3),TB培养基中,25℃,AMP 200 ug/ml,摇床(250 r/min)培养至OD600约为1.5,更换等体积新鲜TB培养基,加入IPTG至终浓度1 mM,AMP 200
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