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- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
10×100μl/50×100μl
| 规格: | 10×100μl | 产品价格: | ¥388.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50×100μl | 产品价格: | ¥1588.0 |
碧云天生产的ArcticExpress (DE3) pRARE2超级感受态细胞,英文名ArcticExpress (DE3) pRARE2 Super Competent Cells,是一种用于可溶重组蛋白表达用的E. coli ArcticExpress (DE3) pRARE2即用型化学感受态细胞。使用pUC19质粒进行热激活转化,转化效率可以高达1×108cfu/μg DNA以上。
ArcticExpress (DE3) pRARE2在ArcticExpress (DE3)基础上改造而成。该菌株在低温条件下(4-12℃)具有优异的蛋白折叠功能,防止包涵体形成,增加具有生物活性的重组蛋白的得率。
ArcticExpress (DE3)携带pRARE2质粒,该质粒表达适应低温的伴侣蛋白cpn10和cpn60。在低温下比传统伴侣蛋白GroEL、GroES等具有更强的促蛋白折叠功能[1];此外,带有氯霉素抗性的pRARE2质粒可补充大肠杆菌缺乏的7种稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA和CGG)对应的tRNA,达到高效表达的目的。
ArcticExpress (DE3) pRARE2菌株可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,因而广泛用于pET系列、pGEX、pMAL等质粒的蛋白表达。该菌株具有四环素、庆大霉素、氯霉素抗性。
ArcticExpress (DE3) pRARE2菌株的基因型为E. coli B F– ompT hsdS(rB–, mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [cpn10cpn60 GentR] pRARE2 (CamR)。
包装清单:| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D1003S | ArcticExpress (DE3) pRARE2超级感受态细胞 | 10×100μl |
| D1003M | ArcticExpress (DE3) pRARE2超级感受态细胞 | 50×100μl |
| - | 说明书 | 1份 |
-80℃保存,一年内有效。避免反复冻融,通常制备6个月后转化效率随保存时间延长而逐渐降低。
注意事项:感受态细胞禁止反复冻融,并应尽可能避免冻融,反复冻融会导致转化效率大幅下降。
感受态细胞融化后,须尽快加入待转化样品,不宜在无转化产物的情况下放置时间超过10分钟或以上时间,以免降低感受态细胞的转化效率。
待转化样品的体积通常不宜超过感受态细胞体积的10%,样品体积过大会导致转化效率下降。
感受态细胞对于温度变化非常敏感,需要避免出现不应有的使用说明之外的温度变化。
感受态细胞对于机械力非常敏感。加入待转化样品时应轻柔操作,不能使用移液枪吹打混匀。
通常仅建议取部分样品用于转化,这样万一遇到转化失败的情况,还留有样品可以再次进行转化。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验抽提。 其实不仅仅是表达,建库克隆都会涉及菌株的不同要求,推荐看看以下文章:克隆/建库/表达专用超级高效感受态细胞 。感受态不是目的,菌株的背景才是关键。
-70℃保种.但是要注意高浓度甘油(> 10%)会导致质粒不稳定.请尽量保持甘油浓度8%.(15%浓度的甘油保种液和新鲜菌液1:1就行) 2、重组质粒不宜长期保存于表达菌株(带DE3的大肠杆菌)中,请尽量使用带有recA endA突变的克隆菌株(比如C600,DH5a)进行质粒抽提和保存质粒.表达型的菌株提质粒经常会有质量不高或者背景的问题.特别是大量抽提. 其实不仅仅是表达,建库克隆都会涉及菌株的不同要求,推荐看看以下文章:克隆/建库专用超级高效感受态细胞 .感受态不是目的
a 、 S.Tag 和可选择的 C- 末端 HSV.Tag a 、 His.Tag 融合标签 · 凝血酶和肠激酶切割位点 · 多克隆位点位于所有读码框中 · 与 AD494 和 Origami 宿主菌株相容,可促进表达蛋白的正确折迭 pET 宿主菌株感受态细胞 所有 pET 系统宿主菌以预测试的感受态细胞形式提供,可立即用于转化。 ( DE3 )指宿主为 λ DE3 溶原菌,其染色体上带有一拷贝由 lacUV5 启动
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










