小鼠单抗制备

单抗制备细节

summerray：请教如题，在脾细胞与瘤细胞融合时的一些问题 1 半分钟内加入PEG后静止一分钟前需不需要稍微吹匀呢，此时有不均匀细胞团块。 2 加入不完全培养液中止聚合后，需不需要先吹匀再离心呢，此时细胞团块在底部。 3 如何避免每个孔内是单个克隆呢，往往有好几个。 4 有限稀释法克隆化时有没有不计数的方法呢，肯定是有（很久以前一个老师那样做过，很难联系），如何操作呢。 多谢！ 丁香园网友yuinsea认为： 1.加PEG时边加边轻轻搅拌 2.终止后，不要吹打，防止聚合

小鼠的一般饲养技巧

一、饲养环境 小鼠对环境的适应性的自体调节能力和疾病抗御能力较其他实验动物差，而小鼠的品种和品系繁多，各个品种和品系都有自己的特殊要求，因此必须根据实际情况给予一个清洁舒适的生活环境。不同等级的小鼠应生活在相应的设施中。 小鼠临界温度为低温 10℃，高温 37℃，温度中性范围 30～33℃。饲养环境控制应达到如下要求：温度 18～29℃；相对湿度 40～70％；最好控制在 18～22℃,湿度 50～60％。一般小鼠饲养盒内温度比环境高 1～2℃，湿度高 5～10％。 要保持温度、湿度相对稳定

单抗制备动物免疫

关于动物免疫，在多抗制备一部分里有一些讲解（点击这里查看），这里只简要讲述一下单抗制备中需要注意的几个问题。在概述部份已经讨论过，用来制备单抗的动物主要有小鼠、大鼠和兔，由于小鼠易饲养、小鼠单抗技术成熟、路线简单，因此是制备单抗使用的主流动物，这里主要以小鼠单抗制备展开讲述。   免疫途径和周期：单抗制备中，免疫动物的方式一般第一针采用皮下免疫，后面的加强免疫采用腹腔免疫、腘内免疫、皮下免疫或者脾内直接免疫。首次免疫和加强免疫结束后，在融合前三天一般还要进行一次冲击