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- 提供酪蛋白酶谱法服务
- 全国
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
酪蛋白酶谱法
- 提供商：
长沙南科生物技术有限公司
- 规格：
200元/每样本
酪蛋白酶谱MMP(3/10)：本方法采用酶谱法(zymography)检测MMP-3/10活性，Zymography是一种基于SDS-PAGE电泳的蛋白酶检测方法，其灵敏度可达1 nM (10~100 pg)，高于ELISA方法。通过制备加有胶原酶底物的SDS-PAGE凝胶，含蛋白酶的样品在凝胶进行电泳，电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer孵育，凝胶进行考马斯亮蓝染色与脱色。凝胶中由于含底物蛋白而被深染，形成深色背景，但在有蛋白酶条带的位置，蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白，因而不被染色而形成透亮区域，从而能同时指示MMP-3/10的大小位置(酶谱)及活性。
样品准备要求：
1）血浆/血清/上清或体液样品准备：血浆或血清样本加入1/10体积的柠檬酸钠，1000rpm离心20分钟，留取上清，以BCA法测定蛋白浓度，测定浓度以后，取约30ug蛋白上样进行电泳检测。样本准备后可暂时4℃保存，不立即测定的样品需-70℃保存，但不宜超过10天。
2）组织样本准备：取100mg新鲜组织以2ml匀浆液进行匀浆（匀浆剂：0.1M Tris/ HCl/pH 7.4 ,0.5% TritonX-100，0.1mg/ml PMSF），12000g 4℃离心5分钟，移取上清层至另一新的1ml离心管待测，取30ug蛋白上样进行电泳检测。样本准备以后，样品可暂时4℃保存，不立即测定的样品需-70℃保存，但不宜超过10天。
3）细胞样本准备：取1个6孔板细胞（每孔细胞量约2×106个细胞），离心后以500ul匀浆液进行超声匀浆（匀浆剂：0.1M Tris/HCl/pH 7.4 ,0.5% TritonX-100，0.1mg/ml PMSF），12000g 4℃离心5分钟，移取上清层至另一新的1ml离心管待测，取30ug蛋白上样进行电泳检测。样本准备以后，样品可暂时4℃保存，不立即测定的样品需-70℃保存，但不宜超过10天。
酶谱电泳图-酪蛋白酶谱
实验周期：10-15个工作日内完成，重复检测优惠。
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文献和实验散后，得到按波长顺序排列的光谱，并对不同波长的辐射进行检测与记录。 光谱仪按照使用色散元件的不同，分为棱镜光谱仪和光栅光谱仪。按照光谱检测与记录方法的不同，可分为：目视法、摄谱法和光电法。 a. 目视法：用眼睛来观测谱线强度的方法称为目视法（看谱法）。这种方法仅适用于可见光波段。常用的仪器为看谱镜。看谱镜是一种小型的光谱仪，专门用于钢铁及有色金属的半定量分析。 b.摄谱法：摄谱法是AES中最常用、最普遍的一种方法，它是用照相的方法把光谱记录在感光板上，即将光谱感光板置于摄谱仪焦面上，接受被分析试样
，同时在 1450cm -1 ， 1375cm － 1 有强峰等。图 14 － 12 是戊酮的红外光谱图。图中从 1300 ～ 4000cm － 1 的频率范围内可以清楚地看到— CH 3 ，— CH 2 —与 基团的 C — H ， CO 键的伸缩 振动的吸收峰。人们通常将此范围内的谱峰称为官能团区的谱峰，它对于了解所测定的化合物内的官能团十分重要。而在 1300 ～ 600cm － 1 范围内的谱峰特征性更强，由于此区的谱峰犹如人手的指纹，故称为指纹区谱带。指纹区谱带比较
尿病相关，微生物来源的 D 型氨基酸可能参与血糖稳态调节。肠道菌群是一个结构复杂和组成动态变化的「无形器官」，通过研究其 D 型氨基酸代谢物的谱图，有助于人们研究菌群和宿主健康的相互关系，阐明机制并开发针对肠道菌的疾病疗法。 本研究首先建立了一个大鼠肠道菌的分离和鉴定的高通量方案，然后采用酶法快速筛选大鼠肠道菌产 D 型氨基酸的能力，最后经 SCX-SPE 富集后采用手性 LC-MS/MS 对这些主要生产菌株进行 D 型氨基酸产物谱的准确定量（图 1）。 图 1：本研究的整体流程示意
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