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- 提供商：
北京恩泽康泰生物科技有限公司
- 服务名称：
外泌体sRNA测序分析服务
- 规格：
价格面议
产品简介
外泌体sRNA组学是当前研究最成熟的RNA组学。恩泽康泰利用特异性分子标签（Unique Molecular Identifiers，UMI）的建库方法，提高定量的准确性；基于二代测序技术对外泌体miRNA、piRNA等进行鉴定、定量和差异表达等分析，可对外泌体sRNA在疾病发生发展、标志物、调控机制等方面进行研究。
技术流程 
建库测序策略
外泌体small RNA文库：基于特异性分子标签（Unique Molecular Identifiers，UMI）的外泌体small RNA建库平台。
测序平台：Illumina NovaSeq平台，推荐单个样本测序数据量：不少于20M raw reads。
分析内容 
结果展示
外泌体small RNA 分析内容很经典；恩泽康泰结合外泌体small RNA的特点，基于丰富的项目经验优化制定严格的内部数据质控标准，确保分析结果真实可信。 常规分析内容如下：外泌体small RNA定性和定量分析、差异分析和差异small RNA靶基因功能富集分析，满足small RNA数据挖掘的需求。 
产品优势
- 外泌体高纯度分离——高纯度外泌体是获得高质量数据的基础，不同的样本采用不同的分离方法组合兼顾外泌体的纯度和得率；
- RNA严格质控——外泌体RNA具有片段化的特征，需要优化外泌体RNA的质控体系评估RNA的质量，降低建库风险；
- RNA超灵敏艰苦——外泌体RNA具有微量的特点，需要采用微量RNA提取和建库方法降低样本和RNA的起始量，提高建库的成功率；
- 外泌体特有分析——RNA具有片段化的特征，需要优化分析参数和深入挖掘RNA片段化的特征，深入解析外泌体RNA的功能和特征；
- RNA的高效验证——外泌体RNA具有微量和片段化的特点，需要选择合适的片段进行引物设计提高PCR验证准确性和验证率。
样本要求
1.外泌体悬液：BCA浓度 1ug/ul，体积＞50ul
2.RNA样本质控：RNA浓度≥300pg/ul，体积＞50ul；Ct (B mRNA) ≤ 34；Ct (A miRNA) ≤ 33；Ct (16s) ≥ 25。
3.送按照要求前处理的原始样本由恩泽提供外泌体分离服务。
| 类型 | 送样量 |
|---|---|
| 血浆 | 2 ml |
| 血清 | 2 ml |
| 细胞上清 | 100 ml |
| 尿液 | 30 ml |
| 胸水 | 30 ml |
| 脑脊液 | 10 ml |
| 胆汁 | 5 ml |
| 关节液 | 5 ml |
| 唾液 | 5 ml |
| 精浆 | 5 ml |
| 卵泡液 | 5 ml |
| 羊水 | 20 ml |
| 乳汁 | 5 ml |
| 宫腔积液 | 2 ml |
| 玻璃体液 | 5 ml |
| 器官保存液 | 20 ml |
项目周期
| 项目 | 周期（样本数量≤50） | 周期（样本数量：50-100） |
| 外泌体sRNA测序分析 | 35 工作日 | 45 工作日 |
交付结果
恩泽交付客户的内容包括：测序原始数据、分析结果文件和结题报告。
经典案例
阿尔茨海默患者血浆的细胞外囊泡MicroRNA分析揭示神经相关网络功能障碍
研究背景：小细胞外囊泡 (sEV) 是新兴的阿尔茨海默病 (AD) 潜在生物标志物，但sEV-microRNA(miRNA) 在AD中的作用尚不清楚。
研究思路：
研究结果：
研究入组158例样本：阿尔兹海默患者 (AD，n=48) 、轻度认知障碍患者 (MCI，n=48) 和健康志愿者 (NC，n=62)；提取全部样本的血浆sEV，提取RNA进行small RNA 测序，构建AD-NC，MCI-AD的诊断模型和WGCNA网络分析。研究发现2个血浆外泌体miRNA组合，分别区分AD-NC，MCI-AD;将临床数据和 small RNA表达进行WGCNA分析发现关键模块M1在MCI、AD中失调;M1模块中大多数miRNA在大脑表达，可作为认知障碍标志物，并揭示神经功能紊乱进展的潜在机制。
Sun Y, Hefu Z, Li B, Lifang W, Zhijie S, Zhou L, Deng Y, Zhili L, Ding J, Li T, Zhang W, Chao N, Rong S. Plasma Extracellular Vesicle MicroRNA Analysis of Alzheimer's Disease Reveals Dysfunction of a Neural Correlation Network. Research (Wash D C). 2023 Apr 13;6:0114. doi: 10.34133/research.0114IF: 11.0 Q1 . PMID: 37223486; PMCID: PMC10202186.
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文献和实验1、组织外泌体miRNA测序分析
Ref：Shen S, Shen Z, Wang C, et al. Effects of lysate/tissue storage at -80°C on subsequently extracted EVs of epithelial ovarian cancer tissue origins. iScience. 2023;26(4):106521. IF=4.6 2区
2、MSC外泌体miRNA测序分析
Ref：Liu Z, Liu Y, Li Y, et al. ECM stiffness affects cargo sorting into MSC-EVs to regulate their secretion and uptake behaviors. J Nanobiotechnology. 2024;22(1):124. IF=10.6 1区
3、293F外泌体miRNA测序分析
Ref：Chen ZQ, Tang TT, Tang RN, et al. A comprehensive evaluation of stability and safety for HEK293F-derived extracellular vesicles as promising drug delivery vehicles. J Control Release. 2025;382:113673. IF=10.5 1区
恩泽康泰进军家畜外泌体研究领域——全面解锁猪/牛/羊/鸡外泌体研究
分析结果表明获得的囊泡平均粒径约80nm左右，颗粒浓度约1E+11 particles/ml。 c.家猪各部位组织全转录组学数据展示 6个组织外泌体进行基于分子条形码UMI的小RNA测序分析，经过去除大片段和小片段以及比对到其他类型ncRNA的数据过滤后，最终剩余的可用有效数据(Unannotated reads)在2-6Mb reads，均>1Mb reads。MiRNA测序数据质量良好。共计检测到438个miRNA (已知283个和新预测155个)。 针对长链RNA测序
的局部持续释放，72 小时内可以完全释放。组织学分析显示没有病理变化，也没有γH2A.X 表达，表明全身毒性极小。牙周再生需要整合牙骨质、牙周韧带和牙槽骨的修复，而不仅仅是骨再生。植入 6 周后，再生骨显得致密、光滑、连续，与周围完整骨非常相似，骨密度显着高于对照组。这些实验结果表明 sEVsmiR−423−5p 增强了大鼠牙周缺损的早期成骨，并促进了牙本质与新生骨之间牙周韧带样纤维的生成。最后作者进行了单细胞 RNA 测序分析，结果发现成纤维细胞构成了牙周组织中的主要细胞群，并在其发育和再生过程中
往往被淘汰掉，因而不适用于Small RNA的分离纯化。有机溶剂抽提能够较好的保留Small RNA，但是后继的沉淀步骤比较费时费力。目前还有另外一些Small RNA分离专用的试剂盒。如MirVana miRNA IsolationKit是采用玻璃纤维滤膜离心柱(glass fiber filter，GFF)，既能够富集10 mer以上的RNA分子，又兼备离心柱快速离心纯化的特点。对于Small RNA测序，我们采用PAGE胶电泳对小RNA进行分离。客户可以选择他们感兴趣的Small RNA长度
