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癌胚抗原放免试剂盒操作说明书

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  • XY-302
  • 2025年07月15日
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      上海信裕

    癌胚抗原放免试剂盒操作说明书
    CEA(HY-014) RIA KIT
    癌胚抗原放免试剂盒操作说明书临床意义:
    人体消化系统的癌胚抗原(CEA),分子量约为150,000-200,000的糖蛋白。CEA是一种结肠癌的相关抗原。测定血液中CEA水平可用作癌症病人的监测,确定治疗效果好坏。肿瘤术后或者药疗之后,血液中CEA水平将下降。手术成功,CEA将持续下降直至正常水平。如手术失败,或癌症复发,CEA血清水平将再次回升到不正常水平。药盒利用均相竟争抑制原理,采用非平衡法对病人血清、血浆、胸水、腹水以及其它体液进行直接测定。
    药盒组成:
    1、 标准6瓶,浓度为0、5、10、20、40、80ng/ml。
    2、 125I-CEA 1瓶。
    3、 CEA抗体1瓶。
    4、分离剂(第二抗体)一瓶。
    样品处理:
    取晨空腹静脉血,分离血清。2-8℃放置可保存一周,若冰冻保存,可放置四周。溶血
    和脂血样品不能使用,混浊样品离心取上清,高浓度血清样品(CEA>80ng/ml),应先用生理盐
    水稀释,计算结果时,要注意样品稀释倍数。胸、腹水、尿液可直接测定。
    癌胚抗原放免试剂盒操作说明书操作方法:
    试管编号,按下表程序操作。
    操作表 ( 单位: ul)
    管 别
    标准品
    样品
    抗血清
    蒸馏水
    混匀,37℃温育2小时。
    125I-CEA
    混匀,4℃过夜,任取三管测总T(CPM)
    分离剂
    NSB管
    100(S0
    --
    --
    100
    100
    1000
    S0
    100
    --
    100
    --
    100
    1000
    S1-S
    100
    --
    100
    --
    100
    1000
    样品管
    --
    100
    100
    --
    100
    1000
    血清NSB管*
    100*
    --
    --
    100
    100
    1000
    *--用新鲜人血清。
    混匀,室温放置15分钟,离心(3500转/分)15分钟,吸弃上清液,测定各管沉淀的放射性计数(CPM)。
    癌胚抗原放免试剂盒操作说明书数据处理:
    1、 计算机处理:建议函数模型采用三次多项式或log~logit法。
    2、 计算、绘图法:
    计算各管的百分率:以S0(cpm数)为B0,各标准管Si(cpm数)为Bi,求各管的百分结合率。
    Bi Bi管(cpm)—NSB管(cpm)
    — %= —————————————— ×100
    B0 B0管(cpm)—NSB管(cpm)
    (1)线性回归:用logX~logitY回归,求出r、a、b值,样品含量可由下式计算得出。
    - a + logit Y
    Log X= ————
    b
    (2)绘图法:用各标准点计算的结果,在log~logit坐标纸上绘制标准曲线图,未知样品浓度可根据Bi/B0的百分结合率从标准曲线图上查出。
    正常叁考值:
    各实验室应建立自己的正常值。下面正常值仅供参考。
    CEA<15ng/mL(15цg/L),阳性值>20ng/mL(20цg/L)。
    技术特性:
    1、曲线范围:(5~80)ng/ml(5~80цg/L)。
    2、灵敏度: < 2ng/ml(2цg/L)。
    3、特异性:CEA抗血清与AFP交叉反应合格。
    4、精密度:(X=30.2ng/mL)批内CVw<4%,批间CVb<6% .
    保存及有效期:
    药盒于(2~8)℃避光保存,切勿冻存。自检定合格之日起有效期为45天。
    药盒参考数据:
    指标
    B/T(%)
    Bi/B0(%)
    项目
    NSB
    S0
    S1
    S
    参数
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        高效转染试剂说明书.pdf       关于百恩维生物  

    • 实验操作

      ,不能得到足够的菌量来抽提质粒,摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型,导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多:容易导致裂解不充分,且容易超过硅胶膜柱的承载上限,最终使得质粒提取效率降低,建议参考提取试剂建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当:比如在加入缓冲液重悬菌体时,菌体没有充分分散悬浮,导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解,可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂(QIAGEN 质粒提取试剂中均有配备 LyseBlue 指示剂),均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用

    • CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting

      %;2. 72 h 后收集细胞提取基因组 DNA(按照基因组 DNA 提取试剂说明书操作);3. 使用事先设计好的引物进行 PCR 扩增,这里使用的酶是 NEB 公司的 Q5 high-fidelity Polymerase,一切按照该酶的说明书严格操作;4. 将目的条带切割下来并使用胶回收试剂回收 DNA 条带,一切按照胶回收试剂说明书进行操作;5. 回收后的 DNA 样本,经 T7 Endonuclease I 酶解验证错配 DNA,部分结果如下:T7 EI验证成功,开始正式实验时间飞逝,上次说

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