JC-1线粒体膜电位染料

货号	22200	存储条件	F/L
规格	5 mg
Ex (nm)	515	Em (nm)	529
分子量	652.23	溶剂

适用范围

用于标记活细胞线粒体

 

简要概述

JC-1是一种独特的双色荧光探针（绿色/橙色），专门用于通过流式细胞术检测线粒体膜电位（ΔΨm），从而评估细胞健康状态。

JC-1是一种阳离子荧光染料，能够特异性标记活细胞中的线粒体。该染料的独特之处在于其荧光颜色会随线粒体跨膜电位（ΔΨM，80-100mV区间）的变化而发生可逆性转变：当膜电位升高时，JC-1单体（绿色荧光）会聚集成J-聚集体（橙色荧光）；反之当膜电位降低时，聚集体又可解离为单体。通过实时监测绿色（单体）与橙色（聚集体）荧光的强度比，即可精确定量线粒体膜电位的变化，这一特性使其成为研究细胞能量代谢和凋亡过程的理想工具。百萤生物是美国AAT Bioquest品牌代理

尽管JC-1在众多实验室中被广泛使用，但其存在水溶性较差的问题。可以用JC-10探针替换。

百萤生物公司简介

美国AAT Bioquest公司长年以来与百萤生物互补优势，为国内外广大用户提供光谱检测，底物显色，荧光发光技术等全系列解决方案。近年来，百萤生物已与多家药企、CRO公司、众多高校及科研单位建立了长期稳定的合作关系；我们的服务宗旨：为广大科研用户提供更好的服务.
1.更高品质保障的AAT Bioquest产品（AAT Bioquest作为专业的光谱学检测产品生产商，能提供 高性价比的产品）。
2.更低的价格和高性价比的选择，我们将一如既往的为客户和代理商提供售后保障。作为代理，百萤生物给您优惠的折扣和专业的技术支持。

注：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其它非科研用途！

产品说明书

JC-1样品分析方案

概述

用测试化合物制备细胞

添加JC-1工作溶液（100μL/孔用于96孔板或25μL/孔用于384孔板）在室温或37℃孵育1小时

移除JC-1工作溶液

读取 Ex / Em = 490 / 525nm和490 / 590nm处的荧光强度

注意：以下是我们推荐的活细胞方案。该方案仅提供指南，实际情况应根据您的具体实验进行调整修改。

 

1.准备JC-1工作溶液：

1.1在高质量无水DMSO中制备2至10 mM JC-1的储备液。 应随用随配及时使用或等分配制，应将使用剩余的溶液等分并在<-20℃冷冻。

注意：避免反复冻融循环，避免光照。

1.2制备1X JC-1工作溶液：在实验当天，将JC-1固体溶解在DMSO中或将等分试样的JC-1储备溶液解冻至室温。在Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或其他缓冲液（pH 7）和0.02％Pluronic®F-127中制备10至30μM1XJC-1工作溶液。

注意：JC-1不溶于水，因此它会在溶液中聚集。 建议在将JC-1工作溶液加载到微孔板之前对其进行过滤。

 

2.用荧光酶标仪进行JC-1检测：

2.1用测试化合物细胞培养所需的一段时间（例如，Jurkat细胞可以用喜树碱处理4-6小时）以诱导细胞凋亡。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相应量的化合物缓冲液。

2.2将100μL/孔的96孔板或25μL/孔的384孔板的JC-1工作溶液（来自步骤1.2）加入到细胞板中。

2.3将JC-1加载在37℃，5％CO₂培养箱中培养15-60分钟。

注意：适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度，每个实验的孵育时间需要根据相应实验进行控制。

2.4从平板上取下JC-1工作溶液，用HHBS或其他缓冲液清洗细胞。 将100μL/孔的96孔板或25μL/孔的384孔HHBS板加回到细胞板中。

2.5监测Ex / Em = 490 / 525nm和490 / 590nm处的荧光变化以进行比率分析。

 

3.用荧光显微镜或流式细胞仪进行JC-1测定：

3.1用测试化合物细胞培养所需的一段时间（例如，Jurkat细胞可以用喜树碱处理4-6小时）以诱导细胞凋亡。

3.2离心细胞，每管取1-5×10⁵个细胞。

3.3在500μLJC-1工作溶液中重悬细胞（来自步骤1.2）。

3.4在室温或37°C下避光孵育10至30分钟。

3.5用HHBS或其他缓冲液洗涤细胞。将细胞重悬于500μLHHBS中以获得每管1-5×10⁵个细胞。

3.6用荧光显微镜（使用FITC和TRITC滤光片）或流式细胞仪（使用FL1和FL2通道）观察Ex / Em = 490 / 525nm和490 / 590nm处的荧光变化。