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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
12个月
- 英文名:
JJ Green Nucleic Acid Stain
- 库存:
10
- 供应商:
西安百萤生物科技有限公司
- 保存条件:
建议低温冷冻保存
简要概述
JJ Green是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料。在游离状态下,JJ Green发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合后,荧光大大增强。因此,JJ Green的荧光信号强度与双链DNA的数量相关,可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。JJ Green的最大吸收波长约为497nm,发射波长最大约为520nm。
JJ Green是高灵敏的DNA荧光染料,适用于各种电泳分析,操作简单:无须脱色或冲洗。至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。JJ Green 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍,用JJ Green染色的凝胶样品荧光信号强,背景信号低。可适用于多种电泳分析。
JJ Green 适合于多种凝胶电泳方法:琼脂糖凝,脉冲电场凝胶电泳,和毛细管电泳等。
JJ Green 与双链DNA的亲和力非常高,因此可以用做电泳前染色,对分子生物学中常用的酶(如:Taq 酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用。另外,JJ Green 与EB相比,诱变能力大大降低。
JJ Green 核酸凝胶染液(JJ Green Nucleic Acid Gel Stains)是一种高敏感性的荧光染液,用于检测琼脂糖凝胶中的双链DNA和寡核苷酸。当染液与核酸结合后,JJ Green 核酸凝胶染液的荧光信号会明显增强,因此经JJ Green 核酸凝胶染液染色的凝胶显示出非常好的信躁比,没有背景荧光。为获得最佳的结果,凝胶最好在跑胶后再进行染色。JJ Green 核酸凝胶染液用于低含量的PCR产物,凋亡研究及异源双链分析中少量DNA的检测较为理想。可应用于:DNA和RNA的检测;SSCP及异源双链分析。
产品说明书
实验方案
1.JJ Green预染方法
1.1该方法适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳
1.2工作液的配制:用电泳缓冲液将10000×的JJ Green稀释10000倍,即为JJ Green工作液。JJ Green工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。
1.3制胶:按常规方法制胶,不含任何染料。
1.4样品染色:向分析样品中加入JJ Green工作液和载样缓冲液,室温放置10分钟,使JJ Green与样品中DNA充分结合。JJ Green工作液加入量为总上样量的1/10。
1.5DNA Marker染色:将5μL DNA Marker和1μL JJ GreenⅠ工作液混匀,室温放置5分钟,使JJ Green与DNA充分结合。
1.6上样、电泳:按常规操作。
2.JJ Green后染方法
2.1按照常规方法进行电泳。
2.2用PH 7.0 - 8.5 的缓冲液(如:TAE,TBE 或 TE),按照3300:1的比例稀释JJ Green浓缩液,混匀,制成3X染色溶液。
2.3将3X染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚/丙/烯/酰/胺/凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上,让工作液均匀地覆盖整个胶板,并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
2.4用蓝盾观测。蓝光可透过玻璃,观测聚丙./烯./.酰/.胺/.凝胶时,可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入蓝盾内观测。
3.JJ Green使用注意事项
3.1在"JJ Green预染色方法"中,电泳时间不要超过2小时,否则JJ Green会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。
3.2在常规用酒精沉淀核酸的过程中,JJ Green 可以全部从双链核酸上去掉。
3.3如果想对用 JJ Green 染过的胶进行 Southern blots,建议在预杂化和杂化溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS。
3.4在紫外照射透视下,与双链 DNA 接合的 JJ Green 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。
3.4JJ Green对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚/丙/.烯/.类容器。
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文献和实验Claudins in a Primary Cultured Puffer Fish (Tetraodon nigroviridis) Gill Epithelium
A primary cultured gill epithelium from the model organism Tetraodon nigroviridis (spotted green puffer fish) has been developed for the study of claudin tight junction (TJ) proteins and their potential role in the regulation of paracellular
Methylated DNA Immunoprecipitation (MeDIP)
directed against 5-methylcytidine (5mC). Input DNA (IN) and methylated DNA (M) can be differentially labeled with Cy5 (red) and Cy3 (green) and co-hybridized as a two-color experiment on microarrays, or used for single-gene analysis by PCR.
。其中最有代表性的要算Gow和Taylor[23],Anliker,Moritz和Ogden,Cheung和Hsiao[24],Patel和Vaishnav,Young、Vaishnar和Pater等。例如,Gow和Taylor通过实验研究了狗动脉的粘弹性;Anliker等人研究了动脉壁的传播特性。他们一致认为:动脉血管是非线性、粘弹性、沿轴向各向异性的。Cheung and Hsiao提出了一种“半实验”的方法来分析动脉组织的粘弹性[24],其研究基于Green-Rivlin理论和颈动脉尖的实验
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