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药物急性毒性实验
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凯基生物
| 药物急性毒性实验 | |
| 实验目的:根据《化学药物急性毒性试验技术指导原则》的要求观察受试样品一次给予动物后的急性毒性反应和死亡情况 实验材料: 受试动物:种系、品系:裸鼠、小鼠 级别:SPF级或清洁级 来源:一般来源于上海斯莱克实验动物有限责任公司,提供实验动物生产许可证原件和实验动物使用合格证复印件 实验内容与方法: 1.给受试样品途径与体积 可采用多种给药方式,如口服(p.o)、静脉注射(i.v)和腹腔注射(i.p) 2.实验分组与观察 预实验将动物随机分为7组,每组2只,摸索最大非致死剂量和最小全致死剂量。并在两者间设置5个组,每组动物8只,给药前动物禁食12h,按体重给药,给药后即观察小鼠的皮肤、眼、活动、摄食、饮水、排便, 呼吸变化及中毒表现和死亡情况共14 d,死亡动物及时尸检,存活小鼠14d后处死并尸检;计算每个剂量的致死情况,计算LD50,如果药物毒性低,在最大剂量组别不致死,就测定最大耐受剂量。最大耐受量实验为取动物雌雄各10只,一次性给予最大剂量,最大容积药物,观察动物有无死亡现象,以确定最大耐受量。 3.统计处理:应用SPSS17.0通过Bliss法计算LD50 实验信息(客户提供): 样品名称: 样品来源:□合成,□提取,□其他: 样品量(准确称量): mg 分子量: 物理性状:□固体,□液体; 溶媒及溶解度: 保存温度:□-20℃;□4℃;□室温;□其他: 服务周期:收到样品两周内提交结果 结果提交:提交实验报告书(LD50或最大耐受量、实验试剂与设备、实验过程、结果分析、原始数据等)。 给药方式: |
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文献和实验【实验目的】 1. 掌握药物半数致死量的概念、测定。 2. 了解急性毒性实验。 【实验原理】 药物半数致死量LD50是指药物急性毒性实验中,当动物死亡率为50%时的单次给药剂量,单位通常为mg/kg。例如,当某药物给予400mg剂量时,可致使一半家兔(体重约为4kg)死亡,则其LD50值为100mg/kg。LD50值通常反映药物急性毒性的大小。药物的急性毒性、慢性毒性实验同属于一般毒理学的研究范畴。此外,药物毒理学研究尚包括特殊毒理学(致癌、致畸
是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法,可替代传统的MTT法。 二、用途 药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。 三、优点 使用方便,无需洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂; CCK-8法能快速检测; CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度; CCK-8法的重复性优于MTT 法,产生的formazan 是水溶性的,减少因洗涤和溶解带来的误差; CCK-8法对细胞毒性小,可以多次测定选取最佳测定时间,与MTT 方法
,这样有助于 DMSO 对紫色结晶物的溶解(尤其在冬天)。以下是我在去年 12 月的一些结果(某种药物的细胞毒性实验,绿色为 control 组,红色为加药组)。下图结果显示,若不 37 ℃ 孵育,紫色结晶溶解不充分,造成 OD 值偏小(细胞毒性实验时,control 组的 OD 值最佳范围为 0.5-0.7)。加入 DMSO 后,37 ℃ 孵育 15 min,振荡 10 min。无孵育,加入 DMSO 后振荡 10 min。以上是我这几年 MTT 实验的心得,与大家分享。祝愿大家实验顺利,早发文章。
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