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MTT药物体外筛选或细胞增殖检测

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  • 江苏南京
  • 2025年12月10日
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      MTT药物体外筛选或细胞增殖检测

    • 提供商

      凯基生物

    MTT药物体外筛选或细胞增殖检测
    实验目的:检测细胞增殖活力或检测样品对细胞体外增殖的影响
    实验原理:活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。
    实验材料:
    试剂:MTT、DMSO
    仪器:超净工作台、CO2培养箱、生物倒置显微镜、酶标仪
    细胞株:见凯基细胞库目录(近三百株人肿瘤细胞、动物肿瘤细胞、、肿瘤细胞耐药株、正常细胞)
    实验内容与方法:
    1. 细胞计数、稀释细胞悬液,接种96孔细胞培养板,培养;
    2. 加入含药培养基,同时设立阴性、溶媒及阳性对照组,培养;
    3. MTT染色,测定;
    4. 计数各组别抑制率及应用SPSS 17.0通过Bliss法计算IC50。
    实验信息(客户提供):
    样品名称: 样品来源:□合成,□提取,□其他:
    样品量(准确称量): mg 注:提供的样品量不低于2mg
    分子量: 物理性状:□固体,□液体
    保存温度:□-20℃;□4℃;□室温;□其他: 溶媒及溶解度:
    毒性:□有,□无,□不详;说明:
    筛选细胞株: 样品作用时间:
    服务周期:收到样品两周内提交结果(如样品数量大于20,周期需适当延长)
    结果提交:提交实验报告书(IC50、实验试剂与设备、实验过程、结果分析、原始数据、细胞图片等)。
    实验范例 : 氟尿嘧啶对人肺癌细胞A549体外增殖的影响
    A549 72h
    Group Mean±SD Inhibitive Rate
    Negative Control Group 0.971±0.046  
    氟尿嘧啶
    IC50=2.205ug/ml
    25ug/ml 0.180±0.008** 81.47%
    12.5ug/ml 0.246±0.025** 74.69%
    6.25ug/ml 0.376±0.042** 61.29%
    3.125ug/ml 0.481±0.053** 50.43%
    1.5625ug/ml 0.576±0.055** 40.67%
    0.78125ug/ml 0.600±0.033** 38.22%
    0.390625ug/ml 0.637±0.046** 34.41%
    0.1953125ug/ml 0.771±0.094* 20.63%
    0.09765625ug/ml 0.780±0.079* 19.65%
    0.048828125ug/ml 0.874±0.073* 9.97%
    0.0244140625ug/ml 0.969±0.036* 0.19%









    Mean±SD,n=5,VS Negative Control Group, *P<0.05, **P<0.01;



    氟尿嘧啶对人肺癌细胞A549体外增殖的影响




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    • 细胞增殖检测MTT法心得

      -孔板的四周边孔,这32个边孔不能使用,建议加入灭菌PBS以饱和中间64个孔的水分。因为细胞培养过程中,边孔的水分蒸发很快,培养液及里面的药物会出现浓缩现象,细胞的状况就复杂了,有些人称之为“边缘效应”这些孔的SD也会狂大,既然如此,不如不用。3、加MTT如果确认你考察的药物没有氧化还原性,你可以直接加入MTT溶液(总体积的1/10),如果你没有把握,建议在加MTT前换一次液;如果你肯定考察的药物的氧化还原性很强,比如谷胱甘肽、Vit E、VitC,那建议你用PBS将细胞洗洗,否则这些药物会将MTT

    • 细胞增殖检测MTT实验经验总结

      平行不加细胞只加培养液的空白对照。其他试验步骤保持一致,最后比色以空白调零。MTT实验吸光度最后要在0-0.7之间,超出这个范围就不是直线关系,IC50是半抑制率,意思是抑制率50%的时候药物的浓度。把药品稀释成不同的浓度,然后计算各自的抑制率,以药品的浓度为横坐标,抑制率为纵坐标作图,然后得到50%抑制率时候的药品浓度,就是IC50。要点:药品2倍稀释,多做梯度,做点线图即可!三、举例各组浓度0.1、0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001,稀释倍数为10,最大

    • MTT法:细胞增殖检测实验步骤与注意事项

      值,记录结果,以时间为横坐标,吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。 二、注意事项 1、选择适当得细胞接种浓度。 2、避免血清干扰:一般选小于10%的胎牛血清的培养液进行试验。在呈色后尽量吸尽孔内残余培养液。 3、设空白对照:与试验平行不加细胞只加培养液的空白对照。其他试验步骤保持一致,最后比色以空白调零。 MTT实验吸光度最后要在0-0.7之间,超出这个范围就不是直线关系, IC50是半抑制率,意思是抑制率50%的时候药物

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