MTT药物体外筛选或细胞增殖检测

MTT药物体外筛选或细胞增殖检测

实验目的：检测细胞增殖活力或检测样品对细胞体外增殖的影响 实验原理：活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。 实验材料： 试剂:MTT、DMSO 仪器:超净工作台、CO2培养箱、生物倒置显微镜、酶标仪 细胞株:见凯基细胞库目录（近三百株人肿瘤细胞、动物肿瘤细胞、、肿瘤细胞耐药株、正常细胞） 实验内容与方法： 1. 细胞计数、稀释细胞悬液，接种96孔细胞培养板，培养； 2. 加入含药培养基，同时设立阴性、溶媒及阳性对照组，培养； 3. MTT染色，测定； 4. 计数各组别抑制率及应用SPSS 17.0通过Bliss法计算IC50。 实验信息（客户提供）： 样品名称： 样品来源：□合成，□提取，□其他： 样品量（准确称量）： mg 注：提供的样品量不低于2mg 分子量： 物理性状：□固体，□液体 保存温度：□-20℃；□4℃；□室温；□其他： 溶媒及溶解度： 毒性：□有，□无，□不详；说明： 筛选细胞株： 样品作用时间： 服务周期：收到样品两周内提交结果（如样品数量大于20，周期需适当延长） 结果提交：提交实验报告书（IC50、实验试剂与设备、实验过程、结果分析、原始数据、细胞图片等）。 实验范例 ： 氟尿嘧啶对人肺癌细胞A549体外增殖的影响 A549 72h Group Mean±SD Inhibitive Rate Negative Control Group 0.971±0.046 　 氟尿嘧啶 IC50=2.205ug/ml 25ug/ml 0.180±0.008** 81.47% 12.5ug/ml 0.246±0.025** 74.69% 6.25ug/ml 0.376±0.042** 61.29% 3.125ug/ml 0.481±0.053** 50.43% 1.5625ug/ml 0.576±0.055** 40.67% 0.78125ug/ml 0.600±0.033** 38.22% 0.390625ug/ml 0.637±0.046** 34.41% 0.1953125ug/ml 0.771±0.094* 20.63% 0.09765625ug/ml 0.780±0.079* 19.65% 0.048828125ug/ml 0.874±0.073* 9.97% 0.0244140625ug/ml 0.969±0.036* 0.19% Mean±SD,n=5，VS Negative Control Group， *P<0.05, **P<0.01； 氟尿嘧啶对人肺癌细胞A549体外增殖的影响

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