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- SRB法药物体外筛选或细胞增殖检测
- 江苏南京
- 2025年12月07日
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SRB法药物体外筛选或细胞增殖检测
- 提供商：
凯基生物
| SRB法药物体外筛选或细胞增殖检测 | |
| 实验目的：检测细胞增殖活力或检测样品对细胞体外增殖的影响 实验原理：磺酰罗丹明是一种能与生物大分子的碱性氨基酸结合的水溶性蛋白染料，其结合于细胞中的量的多少可以反映总蛋白量进而反映细胞数的多少。在515nm波长处的OD值与活细胞数呈良好的线性关系。 实验材料：SRB（SIGMA），其它同MMT法 实验内容与方法： 1. 细胞计数、稀释细胞悬液，接种96孔细胞培养板，培养； 2. 加入含药培养基，同时设立阴性、溶媒及阳性对照组，培养； 3. SRB染色，测定； 4. 计数各组别抑制率及应用SPSS 17.0通过Bliss法计算IC50。 实验信息（客户提供）：同MTT法 |
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文献和实验光谱） 图5 三种染料分别检测EdU孵育2h的Hela细胞（40X） EdU细胞增殖检测方法不需要剧烈的DNA变性操作，只需温和的细胞固定化和透化处理，能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点，更适合结合其他染料或蛋白标记（如P65抗体）等进行多重标记，从而在细胞水平获取更多的直观多维特征信息，更适合深入开展细胞功能方面的研究。 图6 结合P65抗体和EdU，分析药物对细胞增殖及NF-KB信号通路的影响 该方法无需DNA变性，无需抗原修复，无需抗原抗体反应，简单
抑制等。 gRNA文库筛选表型： 1. 肿瘤转移相关基因筛选（体内筛选） 2. 细胞迁移/侵袭相关基因筛选（体外筛选） 3. 细胞克隆形成相关基因筛选（体外筛选） 4. 细胞增殖相关基因筛选（体外筛选） 5. 肿瘤耐药相关基因筛选（体外筛选） 6. 细胞信号通路相关基因筛选（体外筛选） 7. 其他功能基因筛选，如自噬、细胞分化等 gRNA文库应用领域： 1. 探索药物作用机制：药物靶点确定与验证 2. 寻找肿瘤治疗靶点：基因环路上下游调控机制分析 3. 探究代谢疾病治疗机制：代谢通路调节机制分析 和元生物
Nature：『癌症依赖性图谱』计划，能否开辟癌症治疗新道路？
症，在现有模型中代表性不足或完全不存在，这就要求收集的数据范围很大。依赖性图谱的试验阶段主要测量了增殖的替代，进一步的测量将非常有用。例如，确定促进衰老的药物靶标（一种细胞存活但不再分裂的状况），将为新的治疗方法开辟道路。CRISPR 基因编辑技术的精度和大规模实验产生的统计能力极大地有益于可重现的实验。通过测量对药物反应的基因表达，可以揭示哪些基因可能被组合成更有效的疗法等等。该项基于细胞的实验将会避开肿瘤生物学的许多复杂性，虽是如此，当今可用的大多数药物还是来自体外筛选。癌症依赖性图谱的完成可以揭示
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