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CCK-8检测细胞增殖(活力)
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CCK-8检测细胞增殖(活力)|细胞增殖检测
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CCK-8实验原理:
全称为Cell Counting Kit-8,在电子载体1-Methoxy PMS存在的情况下能够被细胞内脱氢酶还原成水溶性的甲臜染料,生成的(橙黄色)甲臜量与活细胞数量成正比,即颜色的深浅与细胞的增殖成正比。因此可以用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
实验一:细胞活性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(37℃,5% CO2)。
2、向每孔加入10 μL CCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。
实验二:细胞增殖-毒性检测
1、在96孔板中配置100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(37℃,5% CO2)。
2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。
3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。
4、向每孔加入10μL CCK溶液(注意不要再孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。
5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
7、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。
服务流程
1.制备细胞悬液:细胞计数
2.接种到96孔板中,同样的样本可做3个重复。
3.37℃培养箱中培养。
4.加入10ul CCK8
5.培养1-4小时
6.测定450nm吸光度
我们的优势:
1.专业技术人员具有数十年流式实验经验,可提供专业技术建议;
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