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- 提供商:
NGB
- 服务名称:
MTT检测
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板
MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在540 或720nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。
实验流程
1. 实验方案设计与确认
2. 细胞培养与接种
3. 细胞处理与检测
4. 数据分析
5. 实验报告提交,包括实验原始数据及分析结果
询价及订购
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无锡欣润生物科技有限公司是一家致力于为全球药物公司、卫生防疫机构和科研院所提供符合GLP标准规范的原代细胞及体外药物代谢和药物间相互作用评价的产品公司,并提供以原代细胞为中心的体外药物筛选相关技术服务的高新技术企业。
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文献和实验这段做MTT走了不少弯路,后来看了园子里有许许多多的建议和指导,再做时结果好了很多,心里很是感激,于是把众多的帖子进行了总结,希望对后来者有所帮助!同时感谢各位前辈的良帖!!MTT大汇总实验前应明确的问题1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满
MTT实验是检测细胞活力的实验方法,由于细胞活力与细胞数呈正相关,因此也常常用来检测细胞的增殖情况。MTT的原理:活细胞有琥珀酸脱氢酶,将MTT还原成棕褐色沉淀。由于一般介绍园子里已经很多,笔者将自己的心得按照实验流程与大家交流交流。1、培养好细胞点板。养细胞没啥好说的,如果不知道细胞如何养,那就看看相关的文献方法。如果知道了细胞的名字,就可以上www.atcc.org检索细胞的培养信息,这个网站上的培养方法是标准培养方法。当然可以根据自己实验要求进行修改。由于细胞计数很繁琐,点板时的细胞
MTT 结果分析关于如何计算 IC501、改良寇式法:lgIC50=Xm-I(P-(3-Pm-Pn)/4)Xm:lg 最大剂量I:lg(最大剂量/相临剂量)P: 阳性反应率之和Pm: 最大阳性反应率Pn: 最小阳性反应率举个例子:各药物浓度作用于某肿瘤细胞后所得 MTT 值如下公式中的最大最小阳性反应率就是最大最小抑制率抑制率=1-加药组 OD 值/对照组 OD 值,如对于 100ug/ml 的药物,其抑制率=1-0.080/0.614=0.869,各组抑制率如下:代入计算公式:Pm
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