0.2 ml PCR 联管，低位

低位嫁接换种

砧木锯槽 用手锯在断面光滑处一侧纵锯宽１厘米左右，深１.２-１.５　厘米，长５～６厘米的楔形缺口，用嫁接刀修切锯槽，使槽内比槽外略宽，槽上比槽下略宽，槽下部２厘米处由内向外倾斜，槽两侧要修切平直。在相应的对面同样开一个槽。 削插接穗 在接穗枝条对称的两侧，稍带木质部削成长４～５厘米的斜面，向内的一侧下端削长约２厘米的短斜面，深达接穗木质髓部，呈楔形，其形状与接口大小相似，穗削成后，对准两侧形成层插入接口，稍向下轻敲，使穗砧密贴。 包扎 接口空隙用锯屑堵塞

Purification of Plasmid from 50 ml-culture

1. Shake E. coli harboring plasmid at 37 C overnight in 50 ml of TB containing appropriate antibiotics. (when using ampicillin, addition of the antibiotics to 100-200 ug/ml rather than usual 50 ug/ml may improve the yield of plasmids.)

0.2mol/L碳酸盐缓冲液（pH9.2～10.7）

pH   0.2mol/L Na2CO3(ml)   0.2mol/L NaHCO3(ml)   9.2