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文献和实验Purification of Plasmid from 50 ml-culture
1. Shake E. coli harboring plasmid at 37 C overnight in 50 ml of TB containing appropriate antibiotics. (when using ampicillin, addition of the antibiotics to 100-200 ug/ml rather than usual 50 ug/ml may improve the yield of plasmids.)
pH 0.2mol/L Na2CO3(ml) 0.2mol/L NaHCO3(ml) 9.2
Biosystems™ 系列荧光定量 PCR 仪加热模块分 0.2 ml 跟 0.1 ml 两种,实验前一定要确定自己的仪器是哪一种加热模块,再来选择对应的耗材。如果 0.1 ml 加热模块用成 0.2 ml 耗材,则会造成耗材压扁,甚至造成机器故障;如果 0.2 ml 加热模块用成 0.1 ml 耗材,则会造成反应管的外壁和荧光定量 PCR 仪器的温控模块没有充分接触,从而出现热传导不充分,进而影响酶的活性,会引起重复性不好(图四),或者溶解曲线多峰(非特异扩增),甚至是假阴性结果; 图四:耗材规格跟加热
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