
CheetaTM Taq --一种专为PCR设计的化学修饰型
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一种专为PCR设计的化学修饰型热启动DNA聚合酶
CheetahTM Taq是BIOTIUM公司于08年9月全球发布的一种化学修饰的热启动 Taq DNA 聚合酶,可以极大减小引物二聚化引起的PCR非特异性扩增。由于使用了创新的修饰试剂,CheetahTM Taq的品质得以提升。和AmpliTaq Gold 以及其他相似的热启动聚合酶相比激活时间更短,活性时间更长。在标准的热启动条件下( 94°C 时在 pH 8-9 的 Tris 缓冲液中 ),CheetahTM Taq 只需 2 分钟就可以恢复 5’-3’聚合酶活性和 5’外切酶活性。CheetahTM Taq 同样也优于基于抗体技术的热启动聚合酶,源于 CheetahTM Taq 在室温下能完全抑制酶活性而激活后几乎能完全恢复。另外,对于制造商来说 CheetahTM Taq 的成本比基于抗体技术的热启动聚合酶更为经济。CheetahTM Taq 拥有完全的专利技术,不依赖于AmpliTaq Gold 和相关技术。欢迎您垂询专利授权等相关信息。
图1. 在琼脂糖凝胶中比较不同热启动 Taq DNA 聚合酶扩增的 PCR 产物。使用快速 PCR 实验步骤,其中
包括在 95 °C 下激活 2 分钟。 PCR 反应分别扩增人的 4 个不同长度的基因组片断 (104 bp , 270 bp
, 110 bp 和 490 bp) 。泳道 N, Q 和 A 分别代表来自供应商 N ,供应商 Q 和供应商 A 的 Taq 酶;泳道 C 使用了 Cheetah Taq ;泳道 1 , 2 , 3 , 4 分别作为 Cheetah Taq 扩增 104 bp, 270 bp, 110
bp 和 490 bp 片断时的空白对照 (nontemplate controls) 。实验结果显示,在被激活的情况下,只有
Cheetah Taq 能高效的扩增出所有 4 种模版的特异性条带。来自供应商 N 的 Taq 酶能微弱的扩增出小片
断 (104 bp 和 110 bp) ,但大片断则完全没有条带 (270 bp 和 490 bp) 。来自供应商 Q 和供应商 A 的
Taq 酶则激活没有活性,泳道上看不到任何明显的条带。
图2. CheetahTM Taq 在不同条件下激活的相对活性 (在 94°C 下分别使用 pH 8.0 ,pH8.5 和 pH 9.0 的 Tris 缓冲液) 。酶活性实验在 60°C 下进行,使用了pH 8.0的Tris 缓冲液。作为比较,使用修饰但未被激活的 CheetahTM Taq 酶在完全相同的条件下进行实验。实验结果显示,CheetahTM Taq 可以在 pH 值 8 到 9 的范围内稳定激活。
图3. 在不同孵育时间下 CheetahTM Taq 和 AmpliTaq Gold 的相对酶活性比较。所有孵育均在 94 °C 下进行,使用 50 nM 的酶和 50 mM pH 8.0 的Tris 缓冲液。
特 性:
- 快速激活
- 完美的活性恢复
- 稳定性提高
- pH 兼容性
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文献和实验for both DNA sample and reaction mixture preparation, is strongly recommended.The reagents for PCR should be prepared separately and used solely for this purpose. Autoclaving of all solutions, except dNTPs, primers and Taq DNA Polymerase is recommended
DNA聚合酶Taq Plus和 Taq Plus I 有什么区别吗?对PCR结果有影响吗? Taq Plus 集扩增效率高和保真度好于一体。能有效地扩增10 kb以下的片段,扩增效率比Pfu高,保真度 Taq Plus 比Taq好。对于有些结构复杂的模板,如GC含量高、有二级结构等可选用Taq Plus扩增。 Taq
out the E.coli strain carrying the Taq polymerase gene on an LB amp plate and innoculate a 5 ml overnight culture with a single colony.• Innoculate a 1 liter culture of LB-amp with the 5 ml of overnight culture and grow to an A600 of 0.2.Add IPTG to a final
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