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- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
25 μl反应×400次/25 μl反应×80次
| 规格: | 25 μl反应×400次 | 产品价格: | ¥1130.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 25 μl反应×80次 | 产品价格: | ¥256.0 |
■ 制品内容 (CN830S:25 μl反应×80次、CN830A:25 μl反应×400次)
| Code No. | CN830S | CN830A | |
| TB Green Premix Ex Taq II FAST qPCR(2X)*1 | 1 ml × 1 | 1 ml × 5 | |
| EASY Dilution II(for Real Time PCR)*2 | 1 ml × 1 | 1 ml × 3 | |
| *1 内含突变型Taq HS,dNTP Mixture,Mg2+,Tli RnaseH、Uracil DNA Glycosylase(UNG),heat-labile、通用参比染料、可视化色素和TB Green。 *2 在逐步稀释total RNA和cDNA时,将其用作稀释溶液。如果用水或TE稀释,可能无法进行准确稀释,但使用EASY Dilution II(for Real Time PCR)可以准确稀释至低浓度,并在宽广的范围内获得准确定量的标准曲线。请注意,此缓冲系统不会影响反转录或PCR的反应性。稀释的模板溶液可以直接用作反转录反应或PCR反应的模板。 注:请勿使用EASY Dilution(for Real Time PCR)(Code No. 9160)稀释本制品。 |
|||
Limited Use Label License:[M82] ■ 制品说明
| 本制品是采用TB Green嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。本制品将适用于快速PCR反应的突变型Taq DNA聚合酶和抑制引物二聚体的因子组合,优化了反应液组成,在保证特异性的同时,实现快速PCR反应和在宽广的动态定量区域内对靶基因进行准确定量、检测,重复性好。此外, 2X Premix试剂中,已预先添加了Tli RNaseH(耐热性RNaseH)和UNG,以cDNA作为模板进行PCR反应时,Tli RNaseH可以很好地抑制由于cDNA中残存mRNA对PCR反应造成的阻害作用,UNG可避免扩增过程中的交叉污染。 本制品是2X浓度的Premix型试剂,预先混有通用参比染料和可视化色素,无需额外在仪器中添加参比试剂以校正孔间荧光信号,可视化色素可以最大限度地减少操作错误。 |
| ■ 保存 |
| 4℃。 |
| 注意:4℃可保存3个月。避光保存,避免污染。长期保存请置于-20℃,一旦开始使用请于4℃保存并在3个月之内使用完。 |
| ■ 产品特点 |
| ♦ 高速反应 |
| 突变型Taq DNA聚合酶,适用于延伸时间10秒的快速PCR反应程序 |
| ♦ 高特异性 |
| buffer添加了引物二聚体抑制因子,最大限度抑制引物二聚体的形成 |
| ♦ 高荧光信号 |
| 荧光信号值更高,扩增曲线&溶解曲线线型更好,信噪比更高 |
| ♦ 高稳定性 |
| 实验验证的多个基因,反应液配置后室温放置48小时仍具有高稳定性,较长操作时间也可获得稳定结果 |
| ♦ 各仪器平台通用 |
| 预混通用参比染料,无需额外添加校正孔间荧光信号的参比染料 |
| ♦ 防止carryover污染 |
| 预混UNG,避免扩增过程中交叉污染导致的假阳性。PCR程序中使用或不使用可自由选择 |
| ♦ 防止加样错误 |
| 预混可视化色素,减少操作错误 |
| ■ 试剂盒特长 |
| 1. 通过Real Time PCR反应,可以快速、准确地对目的基因进行检测、定量。 2. 本制品是预先混有TB Green的2X 浓度的Premix试剂,只需加入引物、模板、灭菌水便可通过嵌合荧光检测法进行Real Time PCR反应。 3. PCR反应使用的是可进行快速PCR反应的突变型Taq HS。缓冲buffer结合了引物二聚体抑制因子,适用于实时PCR。最大限度的抑制了引物二聚体的形成,可以在较短的延伸时间内,以高灵敏度的S/N比进行检测。 4. 在2X Premix试剂中,预先添加了耐热性RNaseH (Tli RNaseH)和UNG,Tli RNaseH可以很好地抑制以cDNA作为模板进行PCR反应时,由于cDNA中残存mRNA对PCR反应造成的阻害作用,UNG可避免扩增过程中的交叉污染。 5. 预先在2X预混试剂中添加了通用参比染料和可视化色素,无需在仪器中额外添加参比试剂以校正孔间荧光信号。 |
| ■ 注意事项 |
| 以下为使用本试剂盒时的注意事项,使用前一定认真阅读。 1. 进行Real Time RT-PCR反应时,反转录反应推荐如下试剂。与本制品组合使用,可以得到可信度高的结果。 PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) (Code No. RR037Q/A/B) PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) (Code No. RR036Q/A/B) PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)(Code No. RR047A/B) 2. 使用前,请上下轻轻颠倒混匀,避免产生气泡,试剂混匀后再使用。试剂混合不均匀会造成反应效果不佳。 (1) 请勿涡旋振荡混匀。 (2) TB Green Premix Ex Taq II FAST qPCR (2X)在-20℃保存时,可能会产生白色或淡黄色的沉淀。可用手握缓慢溶解,或于室温短时间避光放置后,上下颠倒混匀直至沉淀全部消失。 (3) 沉淀会导致试剂组份不均匀,必须混匀后再使用。 3. 配制反应液时,试剂请于冰上放置。 4. 本制品中含有荧光染料TB Green,配制PCR反应液时应避免强光照射。使用后的TB Green Premix Ex Taq II FAST qPCR (2X) 应立即避光存储。 5. 反应液的配制、分装请一定使用新的一次性枪头、尽量避免样品间的污染。 6. 如果定量PCR仪器无法设置延伸时间为10s的快速反应程序,请使用仪器可以设置的最短延伸时间(>10s)。 |
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申请记录
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Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
的LineGene 系列。 随国内生命科学的快速发展,科研水平不断提高,发高水平文章已不再是新鲜事。与其同时,国内公司经过长期不懈的努力,也有自主研发的 real-time PCR 仪器生产比如西安天隆科技公司的 TL 系列仪器。 二、Real-time qPCR 概述 1. Real-time qPCR 原理 实时 PCR 就是在 PCR 扩增过程中,通过荧光信号,对 PCR 进程进行实时检测。一般来讲,定量 PCR 仪包括:实时荧光定量 PCR 仪主要由样品载台、基因扩增热循环组件、微量荧
PCR扩增效率在90%-110%都是可以用于数据分析的。效率低于100%,是由于PCR反应中存在抑制因素;而高于100%可能一些污染、非特异性扩增或者是引物二聚体造成。3. Real-time qPCR的种类根据real-time qPCR的化学发光原理可以分为2大类:一类为探针类,包括TaqMan@探针和分子信标,利用与靶序列特异杂交的探针来指示扩增产物的增加;一类为非探针类,其中包括如SYBR@Green I或者特殊设计的引物(如LUX@Primers) 通过荧光染料来指示产物的增加
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