![Annexin V-EGFP/PI细胞凋亡检测试剂盒[可申请试用]](https://img1.dxycdn.com/2019/0606/549/3349645732931272202-14.jpg)
- ￥388
- 翌圣生物（Yeasen）
- 上海翌圣
- 40303ES20
- 2025年10月14日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
有效期1年
- 英文名：
Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件：
4℃避光储存
- 规格：
20T
|
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
|
Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit Annexin V-EGFP/PI 细胞凋亡检测试剂盒 |
40303ES20 |
20 T |
|
40303ES50 |
50 T | |
|
40303ES60 |
100 T |
产品描述
Annexin V-EGFP/PI细胞凋亡检测试剂盒是用EGFP标记了的Annexin V作为探针，来检测细胞早期凋亡的发生。
其检测原理为：在正常的活细胞中，磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36 kDa的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。
另外，本试剂盒中还提供了碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此，将Annexin V与PI联合使用时，PI则被排除在活细胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡细胞（Annexin V+/PI-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被EGFP和PI结合染色呈现双阳性（Annexin V+/PI+）。
本试剂盒需要使用流式细胞仪进行检测。
产品组分
| 编号 | 组分 | 产品编号/规格 | ||
| 40303ES20（20 T） | 40303ES50（50 T） | 40303ES60（100 T） | ||
| 40303-A | Annexin V-EGFP | 0.1 mL | 0.25 mL | 0.5 mL |
| 40303-B | PI Staining Solution | 0.2 mL | 0.5 mL | 1 mL |
| 40303-C | 1×Binding Buffer | 10 mL | 25 mL | 50 mL |
运输与保存方法
冰袋（wet ice）运输。-20 ℃避光长期保存，避免反复冻融，一年有效。
【注】：如果需要在短时间内多次重复使用，可以在4 ℃避光保存，半年有效。
注意事项
1）由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2） 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-EGFP的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后，轻摇时胰酶与细胞充分接触，然后倒掉大部分胰酶，利用剩余的少量胰酶再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3） 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定前需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用Binding Buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4）如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5）试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6）Annexin V-EGFP和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
操作方法
实验设计
空白管：阴性对照细胞，不加Annexin V-EGFP和 PI Staining Solution ，用于调节电压。
单染管：阳性对照细胞，只加Annexin V-EGFP，用于调节补偿。
检测管：处理的细胞，加Annexin V-EGFP和PI Staining Solution。利用空白管和单染管调节好的参数进行实验数据的获得。
1.1 样品染色
1）悬浮细胞：300 g，4 ℃离心5 min收集细胞；
贴壁细胞：用不含EDTA的胰酶消化后，300 g，4 ℃离心5 min收集细胞。胰酶消化时间不宜过长，以防引起假阳性；
2）用预冷的PBS洗涤细胞2次，每次均需300 g，4 ℃离心5 min；
3）用1×Binding Buffer重新悬浮细胞，调节其浓度为1~5×106/mL；
4）取100 μL的细胞悬液于5 mL的流式管中，加入5 μL Annexin V-EGFP，混匀后于室温避光孵育5 min；
5）加入10 μL PI Staining Solution，并加400 μLPBS，立刻进行流式检测。
【注】：用流式检测凋亡时，PI受时间的影响很大，时间过长会导致PI的染色增加，所以需要在1 h内完成流式检测。
1.2流式细胞仪分析
EGFP最大激发波长为488 nm，最大发射波长为507 nm；PI-DNA复合物的最大激发波长为535 nm，最大发射波长为615 nm。用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），EGFP为横坐标，PI为纵坐标。每个样采集10，000 events。典型的实验中，细胞可以分成三个亚群，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色荧光双重染色。
产品信息
|
货号 |
品名 |
规格 |
|
40302ES20 |
Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit |
20T |
|
40302ES50 |
50T | |
|
40302ES60 |
100T | |
|
40303ES20 |
Annexin V-EGFP/PI 细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit |
20T |
|
40303ES50 |
50T | |
|
40303ES60 |
100T | |
|
40304ES20 |
Annexin V-Alexa Fluor 647/PI 细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-Alexa Fluor 647/PI Apoptosis Detection Kit |
20T |
|
40304ES50 |
50T | |
|
40304ES60 |
100T | |
|
40305ES20 |
Annexin V-Alexa Fluor 488/PI 细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit |
20T |
|
40305ES50 |
50T | |
|
40305ES60 |
100T | |
|
40310ES20 |
Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit |
20T |
|
40310ES50 |
50T | |
|
40310ES60 |
100T |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验[1] Gao W, Liu Y, Zhang H, Wang Z. Electrochemiluminescence Biosensor for Nucleolin Imaging in a Single Tumor Cell Combined with Synergetic Therapy of Tumor. ACS Sens. 2020;5(4):1216-1222. doi:10.1021/acssensors.0c00292(IF:7.333)
[2] Duan M , Xia F , Li T , et al. Matrix metalloproteinase-2-targeted superparamagnetic Fe3O4-PEG-G5-MMP2@Ce6 nanoprobes for dual-mode imaging and photodynamic therapy. Nanoscale. 2019;11(39):18426-18435. doi:10.1039/c9nr06774d(IF:6.970)
[3] Yao M, Han W, Feng L, et al. pH-programmed responsive nanoplatform for synergistic cancer therapy based on single atom catalysts. Eur J Med Chem. 2022;233:114236. doi:10.1016/j.ejmech.2022.114236(IF:6.514)
[4] Zhang H, Gao W, Liu Y, Sun Y, Jiang Y, Zhang S. Electrochemiluminescence-Microscopy for microRNA Imaging in Single Cancer Cell Combined with Chemotherapy-Photothermal Therapy. Anal Chem. 2019;91(19):12581-12586. doi:10.1021/acs.analchem.9b03694(IF:6.350)
[5] Wang L, Zhang Y, Han Y, et al. Nanoscale photosensitizer with tumor-selective turn-on fluorescence and activatable photodynamic therapy treatment for COX-2 overexpressed cancer cells. J Mater Chem B. 2021;9(8):2001-2009. doi:10.1039/d0tb02828b(IF:6.331)
[6] Liu Y, Yao M, Han W, Zhang H, Zhang S. Construction of a Single-Atom Nanozyme for Enhanced Chemodynamic Therapy and Chemotherapy. Chemistry. 2021;27(53):13418-13425. doi:10.1002/chem.202102016(IF:5.236)
[7] You X, Zhou Z, Chen W, Wei X, Zhou H, Luo W. MicroRNA-495 confers inhibitory effects on cancer stem cells in oral squamous cell carcinoma through the HOXC6-mediated TGF-β signaling pathway. Stem Cell Res Ther. 2020;11(1):117. Published 2020 Mar 14. doi:10.1186/s13287-020-1576-3(IF:5.116)
[8] Xu S, Luo W, Xu X, et al. MD2 blockade prevents oxLDL-induced renal epithelial cell injury and protects against high-fat-diet-induced kidney dysfunction. J Nutr Biochem. 2019;70:47-55. doi:10.1016/j.jnutbio.2019.04.003(IF:4.490)
[9] Liu K, Sun T, Luan Y, et al. Berberine ameliorates erectile dysfunction in rats with streptozotocin-induced diabetes mellitus through the attenuation of apoptosis by inhibiting the SPHK1/S1P/S1PR2 and MAPK pathways. Andrology. 2022;10(2):404-418. doi:10.1111/andr.13119(IF:3.842)
[10] Sun T, Xu W, Wang J, et al. Paeonol ameliorates diabetic erectile dysfunction by inhibiting HMGB1/RAGE/NF-kB pathway [published online ahead of print, 2022 Jun 9]. Andrology. 2022;10.1111/andr.13203. doi:10.1111/andr.13203(IF:3.842)
[11] Zuo Y, Xu H, Chen Z, et al. 17‑AAG synergizes with Belinostat to exhibit a negative effect on the proliferation and invasion of MDA‑MB‑231 breast cancer cells. Oncol Rep. 2020;43(6):1928-1944. doi:10.3892/or.2020.7563(IF:3.417)
[12] Hu P, Dong ZS, Zheng S, et al. The effects of miR-26b-5p on fibroblast-like synovial cells in rheumatoid arthritis (RA-FLS) via targeting EZH2. Tissue Cell. 2021;72:101591. doi:10.1016/j.tice.2021.101591(IF:2.466)
