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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Annexin V-EGFP/PI
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 保存条件:
-20℃避光保存,避免反复冻融。孵育缓冲液2-8℃保存
- 规格:
20T/50T/100T
Annexin V-EGFP/PI 双染细胞凋亡检测试剂盒
产品概述
-
储存条件:
2-8℃避光保存。长期保存于-20℃避光。避免反复冻融。
Annexin V-EGFP/PI 双染细胞凋亡检测试剂盒有效期:
一年。
Annexin V-EGFP/PI 双染细胞凋亡检测试剂盒产品简介:
细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。AnnexinⅤ是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的PS高亲和力特异性结合。用标记了EGFP的AnnexinⅤ作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生,正常细胞和早期凋亡细胞的细胞膜是完整的。Propidium iodide(PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜与细胞核结合呈现红色。将AnnexinⅤ与PI匹配使用,可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞以及死细胞区分开来。在双变量流式细胞仪的散点图上,左下象限显示活细胞,为(EGFP-/PI-);右上象限是非活细胞,即坏死细胞,为(EGFP+ /PI+ );而右下象限为凋亡细胞,显现(EGFP+ /PI-)。(图1) Annexin V-EGFP细胞凋亡检测试剂盒可以方便快捷的检测凋亡细胞,使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。
产品特点:
● 方便:可用流式细胞仪或荧光显微镜检测;
● 快速:1小时内即可完成实验;
● 准确:能准确区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞,并计数各群细胞的比例。
检测方法:
流式细胞仪或荧光显微镜
样本类型:
● 悬浮细胞 ● 贴壁细胞
参考文献:
● Kun Zhang et al. HILI Inhibits TGF-β Signaling by Interacting with Hsp90 and Promoting TβR Degradation PloS one 2012 (IF=4.092)
● Xiucai Xu, Tingting Liu et al. ROS-triggered trophoblast apoptosis is initiated by ER stress via activation of caspase12, CHOP and the JNK pathway in Toxoplasma gondii infection in mice Infection and Immunity April 2012, volume 80, issue 4 (IF=4.098)
● Yilu Lu et al. Piwil2 Suppresses P53 by Inducing Phosphorylation of Signal Transducer and Activator of Transcription 3 in Tumor Cells PloS one 2012 (IF=4.092)
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文献和实验Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
膜,但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。 因此,将Annexin V与PI联合使用时,PI 则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。 图Annexin V 检测细胞凋亡原理二、试剂盒组份
Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD
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