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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
大量
- 供应商:
爱尔兰Megazyme公司
- 英文名:
Fructanase Mixture Powder
- 保质期:
1年以上
- 保存条件:
4-6摄氏度
- 规格:
3g
产品信息----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
产品名称:1,4-β-D-半乳糖内切酶检测底物 品牌: Megazyme
货号:I-AZGLP 英文名:1,4-β-D-galactose endonuclease detection substrate
供应商:北京中检葆泰生物技术有限公司 产地:美国
保质期:一年 保存条件:低温保存
产品简介--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
内切酶是目前业最丰富的限制性核酸内切酶产品系列之一。在酶学领域数十年的专业积累、丰富的同裂酶选择、生产设施带来的高纯度酶生产能力,共同助力打造出使用统一缓冲液体系的限制性内切酶系统。
乳糖是一种白色结晶双糖,它存在于哺乳动物所分泌的乳中。在乳糖酶(β-半乳糖苷酶)催化下,乳糖水解产生D-半乳糖和D-葡萄糖。缺乏此酶的成年人不能消化牛奶中的乳糖,摄入含乳糖食品30分钟至两个小时后会出现呕吐、腹部绞痛、排气和腹泻等症状,称为乳糖不耐症。美国人中有3千万到5千万人患有乳糖不耐症,并且某些人种和种族更为严重。高达75%的非裔美国人和土著美国人及90%亚裔美国人都患有乳糖不耐症,而北欧血统的人则很少出现这一症状。
酶法分析测定乳糖的主要原理为β-半乳糖苷酶催化乳糖水解产生D-半乳糖和D-葡萄糖,通过检测D-半乳糖和D-葡萄糖的含量计算乳糖含量。检测D-半乳糖含量比检测D-葡萄糖含量更可靠,因为游离D-葡萄糖含量通常高于游离D-半乳糖含量。
目前市场上的D-半乳糖检测试剂盒检测速度非常慢。因为D-半乳糖包括α-和β-两种形式,并且自然化学变旋的概率很低,而β-半乳糖脱氢酶往往只识别β-形式。开始孵育时,由于β-D-半乳糖快速被消耗,因此吸光度值迅速增加,随后由于α-D-半乳糖转变为β-D-半乳糖的速率非常低,因此吸光度值慢慢增加达到终点。Megazyme乳糖和半乳糖检测试剂盒采用专利技术,在试剂盒中加入半乳糖变旋酶,可快速催化限速变旋步骤,室温下5分钟即可获得检测结果
产品用途------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
本标准适用于新鲜或冷冻的畜、禽肉与内脏及其制品中克伦特罗残留的测定。
实验原理------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
根据当前的检测方法(AOAC 984.15修订版 牛奶中乳糖的检测),在pH 5.0下,乳糖被β-半乳糖苷酶催化,水解为D-半乳糖和D-葡萄糖(1
注意事项-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
- 如果在指定时间 (约10分钟) 内完成D-乳糖转化,一般认为没有发生干扰。但仍可以通过向反应结束后的比色皿中加入D-乳糖(大约0.1mL 40μg)作进一步验证,加入后溶液吸光值会明显增加。待测样品中的干扰物质可以通过向比色皿中加入试剂盒附带的内标物进行分析确定。将标准品进行定量回收。样品在处理和提取过程中的损失可通过回收试验进行确定,如在样品最初的提取步骤中,向样品中加入乳糖D-半乳糖。
二价金属离子会抑制β-半乳糖脱/氢酶的活性,而Tris/HCL缓冲液中含有的EDTA可以螯合二价金属离子,从而消除抑制效应。
- D-半乳糖检测所用的试剂不含有毒物质。但是,浓缩的缓冲液中含有防腐剂die/氮化/钠(0.02 % w/v),应该遵守实验室安全操作规范。
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文献和实验无
异丙基-1-硫代β-D吡喃(型)半乳糖 isop-ropyl-1-thio-β-D-galactopyranoside
异丙基 -1-硫代β -D吡喃(型)半乳糖 isop-ropyl-1-thio-β -D-galactopyranoside 为 isopropyl-1-thio-β -D-galactopyranoside的缩写。是诱导大肠杆菌乳糖操纵子酶合成的强力诱导物。在培养基中加入该物 10-4 克分子时,即可通过存在于大肠杆菌细胞膜中的微量半乳糖苷渗透酶而被参入至细菌体内。通常诱导物质即根据这种通过操纵子的作用制造的β -半乳糖糖苷酶而被利用于代谢的。但 IPTG等不能
邻硝基苯-β-吡喃半乳糖苷 O-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside
缩写为 ONPG。是广泛利用于β -半乳糖苷酶活力测定的底物。水解后可游离出邻硝基酚,由于邻硝基酚在碱性条件下呈黄色( 420毫微米光吸收),所以容易进行比色定量。另外利用这种性质,还可用于分离各种代谢调节突变株。
时,其灵敏度和定量与荧光基质底物4-MU(四甲基伞形酮)相关。 2 应用原理 4-MU酯类只有裂解之后才能产生荧光。进行荧光素酶检测主要基于以下原理:首先要水解含有4-MU的底物,比如β-葡萄糖醛酸酶水解β-4-MU-葡萄糖醛酸或β-Gal水解β-4-MU-半乳糖。β-Gal水解4-MU-β-D-半乳糖产生的荧光分子4-MU,在365nm激发时能在460nm处产生发射光。 Turner BioSystems
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