HUGO-Ab-eKO同源速敲

HUGO-Ab-eKO同源速敲

人鼠同源性高于90%的靶点在免疫小鼠时，往往因免疫应答弱而导致血清抗体滴度不足，也限制了后续的抗体发现过程。赛业生物以HUGO-Ab全人源抗体小鼠为基础，整合完备的技术平台，全面启动了“HUGO-Ab-eKO同源速敲”计划，可精准敲除小鼠体内与目标靶点同源的鼠源基因，让全人源抗体小鼠能更敏锐地识别人类靶点的独特表位，直接触发更强的免疫应答，轻松拿到高亲和力、高特异性的全人源抗体。诚邀全球研究人员合作开发，助力治疗性抗体新药研发！

 

HUGO-Ab-eKO同源速敲模型推荐

靶点名称	小鼠品系	人‑鼠同源性 (%)	小鼠基因名称
ACVR2A	HUGO-Mab、HUGO-Light	99.61	Acvr2a
MSTN (GDF8)	HUGO-Mab、HUGO-Light	96.01	Mstn
IL17RB	HUGO-Mab、HUGO-Light	75.5	Il17rb
INHBE	HUGO-Mab、HUGO-Light	83.71	Inhbe
ALK7 (ACVR1C)	HUGO-Mab、HUGO-Light	93.31	Acvr1c
GIPR	HUGO-Mab、HUGO-Light	81.55	Gipr
VEGF-A	HUGO-Nano	84.56	Vegfa
Activin A (INHBA)	HUGO-Mab、HUGO-Light	96.48	Inhba
ACVR2B	HUGO-Mab、HUGO-Light	94.96	Acvr2b
CLDN18.2	HUGO-Light	88.26	Cldn18
CDH17	HUGO-Light	79.81	Cdh17
STEAP1	HUGO-Light	83.48	Steap1
PD1 (PDCD1)	HUGO-Light	62.5	Pdcd1
GPRC5D	HUGO-Light	81.74	Gprc5d
CTLA-4	HUGO-Light	77.58	Ctla4
CD5	HUGO-Light	69.09	Cd5
CD7	HUGO-Light	52.5	Cd7
CLEC5A	HUGO-Light	73.16	Clec5a
CLEC7A (Dectin-1)	HUGO-Light	62.75	Clec7a
IL4Rα (IL4R)	HUGO-Light	57.45	Il4r
IL11	HUGO-Light	87.94	Il11
FcRn (FCGRT)	HUGO-Light	69.86	Fcgrt
IL15	HUGO-Light	75.93	Il15
CD122 (IL15Rβ, IL2RB)	HUGO-Light	62.79	Il2rb
TNF-α (TNFA)	HUGO-Light	79.15	Tnf
PCSK9	HUGO-Light	78.82	Pcsk9
STEAP2	HUGO-Light	96.53	Steap2
GPR75	HUGO-Light	88.33	Gpr75
CCN4 (WISP1)	HUGO-Light	85.29	Wisp1
uPARAP	HUGO-Light	91.08	Mrc2
B7H3 (CD276)	HUGO-Light	55.06	Cd276
PD-L1 (CD274)	HUGO-Light	72.41	Cd274
IL17A (IL17A/F)	HUGO-Light	63.29	Il17a
IL1RAP	HUGO-Light	89.47	Il1rap
TL1A (TNFSF15)	HUGO-Light	70.63	Tnfsf15
IL33	HUGO-Light	57.78	Il33
ST2 (IL33R, IL1RL1)	HUGO-Light	67.9	Il1rl1
IL-31	HUGO-Light	46.95	Il31
IL13	HUGO-Light	56.16	Il13
IL23 (IL23A)	HUGO-Light	74.49	Il23a
ALB (Albumin)	HUGO-Nano	26.04	Alb
VISTA (VSIR)	HUGO-Light	77.81	Vsir
PODXL (Podocalyxin)	HUGO-Nano	55.02	Podxl
CD16A (FCGR3A)	HUGO-Light	63.78	Fcgr3
NKp46 (NCR1)	HUGO-Light	59.38	Ncr1
IL-6R	HUGO-Light	59.62	Il6r
FAP	HUGO-Light	89.88	Fap
IL-36R	HUGO-Light	68.87	Il1rl2
MASP-2	HUGO-Light	83.09	Masp2
IL-18	HUGO-Light	66.84	Il18
IL-25 (IL-17E)	HUGO-Light	73.45	Il25
PACAP	HUGO-Light	84.09	Adcyap1
IL-23R	HUGO-Light	70.03	Il23r
C5aR1	HUGO-Light	71.79	C5ar1
NaPi2b (SLC34A2)	HUGO-Light	80.2	Slc34a2
IL-5	HUGO-Light	71.64	Il5
IL-5Rα	HUGO-Light	69.76	Il5ra
IL-22	HUGO-Light	79.33	Il22
TREM2	HUGO-Light	70.87	Trem2
LRRC15	HUGO-Light	82.44	Lrrc15
RANKL	HUGO-Light	86.12	Tnfsf11
ALPPL2	HUGO-Light	75.75	Alppl2
TSPAN8	HUGO-Light	73	Tspan8
TSLP	HUGO-Light	43.4	Tslp
TSLPR	HUGO-Light	45.28	Tslpr
α-Synuclein	HUGO-Nano	95	Snca
LPAR1	HUGO-Mab、HUGO-Light	97.3	Lpar1
TMEFF2	HUGO-Light	98.93	Tmeff2
TFR1	HUGO-Nano	76.8	Tfr1
CD98HC	HUGO-Light、HUGO-Nano	69.6	Slc3a2

HUGO-Ab-eKO同源速敲技术流程

相比传统的小鼠基因敲除（KO）技术，HUGO-Ab-eKO同源速敲技术获得可用于免疫的纯合KO的小鼠节约7-8个月时间，实现更强的免疫应答能力、更高的抗体筛选成功率和困难靶点开发效率。

HUGO-Ab-eKO同源速敲技术流程

 

HUGO-Ab-eKO同源速敲核心优势

1. 高难靶点突破

精准敲除小鼠靶点基因，显著提升人鼠同源性高于90%靶点的免疫应答。免疫后血清抗体滴度达到1：243000以上，且筛选出的阳性抗体数比未敲除小鼠提升5-10倍。

2. 研发效率倍增

基于HUGO-Mab全人单克隆抗体小鼠可直接获得全人源抗体，跳过抗体的体外改造环节，缩短3-6个月研发周期。

3. 技术可靠且合规

TurboKnockout技术做基石，实现基因原位替换，无脱靶效应，知识产权清晰，让新药申报更省心。

4. 定制交付灵活

支持个性化定制需求，从靶点分析到小鼠制备，专业团队全程跟进，最快3个月交付4周龄eKO小鼠，满足多样化研发需求和节奏。

 

HUGO-Ab-eKO同源速敲平台合作模式

小鼠直供模式：交付绝育抗体小鼠，抗原免疫、抗体效价检测等实验工作由客户在自有指定设施内自主完成。

一站式抗体筛选服务：提供全流程一体化服务，涵盖小鼠免疫、抗体筛选、抗体活性验证全环节。

联合开发模式：整合双方技术与资源优势，协同开发创新型抗体疗法。

 

HUGO-Ab-eKO同源速敲小鼠验证数据

ACVR2A HUGO-Mab-eKO小鼠验证数据

先对HUGO-Mab小鼠的ES细胞进行建系，继而在HUGO-Mab ES基础上进行mouse ACVR2A基因的纯合敲除，KO后的纯合ES克隆不表达mouse ACVR2A mRNA。

HUGO-Mab小鼠敲除mouse ACVR2A 后ES克隆mRNA分析

 

将获得的纯合敲除ES克隆通过TurboKnockout技术显微注射到小鼠胚胎中，出生小鼠4周时采集ACVR2A高表达组织进行mouse ACVR2A表达量分析，未检测到mouse ACVR2A转录。

HUGO-Mab小鼠敲除mouse ACVR2A后小鼠高表达组织mRNA分析

 

待小鼠6周龄后，对KO后小鼠和KO前小鼠分别进行ACVR2A蛋白4次免疫，eKO10小鼠免疫后血清效价明显优于KO前小鼠。

ACVR2A eKO前、后小鼠四免血清效价检测

 

 

HUGO-Ab-eKO同源速敲小鼠靶点筛选案例

1. 高同源性靶点：HUGO-Mab-eKO小鼠加速ACVR2A抗体开发

ACVR2A蛋白是一个极具潜力的减重增肌靶点。但是该蛋白的人鼠同源性达到99.6%，用人ACVR2A蛋白免疫全人抗体鼠往往难以产生足够的血清抗体滴度。因此，将HUGO-Mab小鼠的靶点基因敲除后再进行免疫可以提高对ACVR2A蛋白的免疫应答。本研究依托HUGO-Ab-eKO同源速敲平台，成功筛选获得全人源、高选择性ACVR2A单克隆抗体A0009 IgG1、A0040 IgG1，可精准阻断ACVR2A介导病理信号，具备代谢及肌肉相关疾病治疗潜力。

 

靶点亲和力与选择性

经Biacore表面等离子共振亲和力检测：候选抗体A0009、A0040对靶点ACVR2A呈纳摩尔级高亲和力；对同源蛋白ACVR2B结合活性极低，靶点选择性显著优于一代对照IgG抗体，可降低脱靶相关副作用。

 

双通路信号强效阻断

本研究构建两条信号通路重组体系，用于模拟组织特异性信号传导，其中ACVR2A-ALK4-pSMAD2/3通路（模拟肌肉组织信号通路）用于调控肌细胞生成与生长相关基因；ACVR2A-ALK7-pSMAD2/3通路（模拟脂肪细胞信号通路）用于调控脂质代谢与脂肪分化相关基因。配体刺激后，两条通路均可通过磷酸化SMAD2/3实现SBE荧光素酶报告基因激活，产生荧光信号。A0009 IgG1与A0040 IgG1抗体可有效阻断通路激活，抑制效果呈浓度依赖性，在肌肉样、脂肪样两种细胞模型中均能下调报告基因表达。二者的通路阻断特征与参比IgG1（一期临床可变区序列）高度吻合，说明在两种细胞体系中，两种抗体对ACVR2A介导信号通路的抑制活性相当。

不同配体作用下ACVR2A-SBE-LUC报告基因检测实验

 

药代动力学优势

采用抗IgG抗体检测法，于野生型C57BL/6N小鼠体内单次给药20 mg/kg，评价三种抗体的血清药代动力学参数。 与对照组IgG1（一期临床可变区序列）相比，A0009 IgG1与 A0040 IgG1均具备更优异的药代动力学特征。A0009 IgG1半衰期为参比IgG1的2.4倍，体内稳定性显著提升；其峰值血药浓度、药物总暴露量分别达到参比抗体的1.8倍、3.0倍，证实该抗体体内循环时间更长、全身药物暴露水平大幅提高。A0040 IgG1同样优势明显：半衰期略长于参比抗体，峰值血药浓度、曲线下面积分别为参比的1.8倍、2.5倍，提示其体内清除速率更慢，整体药物暴露量显著改善。

野生型C57BL/6N小鼠血清药代动力学参数（抗IgG抗体检测法）

 

Anti-ACVR2A可改善饮食诱导肥胖（DIO）小鼠的机体组成

本研究采用饮食诱导肥胖（DIO）小鼠模型，考察多款抗体对小鼠体重及机体成分的干预作用。结果显示，A0040在降低总体重与脂肪量方面药效效果好，显著优于其余受试抗体。 在促肌肉增长（瘦体重提升）指标上，A0009与A0040的效果均显著优于对照抗体，说明两款抗体均可维持并促进肌肉增生。综上，A0040兼具强效减重、减脂与增肌多重获益；A0009则以突出的增肌效果见长。二者均具备良好开发潜力，可推进后续研究。

抗ACVR2A抗体干预DIO小鼠机体组成分析

 

依托HUGO-Ab-eKO同源速敲平台，我们成功构建了一组全新全人源抗ACVR2A抗体。先导抗体A0009与A0040具备亚纳摩尔级靶点亲和力，相较于同源蛋白ACVR2B，对 ACVR2A拥有极高靶向选择性，同时拥有优异的药代动力学特征。在饮食诱导肥胖（DIO）小鼠模型中，A0040减重、减脂效果突出；A0009与A0040两款分子均能保护、提升肌肉量。在CB-17重症联合免疫缺陷小鼠模型中，A0009和A0040可显著提升小鼠抓握力，证明其能够有效改善肌肉功能。该系列抗体克服了现有治疗方案的核心短板。综上研究结果表明，A0009与A0040具备巨大开发价值，有望成为代谢疾病、肌肉骨骼相关病症的新型候选治疗药物。