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- 北京普利莱
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- E1030
- 2025年12月06日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Nitric Oxide Assay Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
北京普利莱
- CAS号：
无
- 保存条件：
4度避光
- 规格：
500次
描述：是一种重要的气体信号分子和效应分子，可以作为第二信使参与许多生物效应和生理病理过程。体内NO含量低，半衰期短，且易被氧化。Griess反应一直是最经典的生物样品NO测定方法，反应产物的光密度OD值与NO浓度呈线性关系。本试剂盒基于Griess 反应原理，采用优化的反应条件和比色法测量液体样品NO的浓度。方法简单，线性范围2.5~800µM。按照每150 µl反应体系含50 µl样品推算，相当于样品的检测灵敏度约为300 pmol/50 µl。
参考文献：
- Bredt, D.S. and Snyder, S.H. (1994) Nitric oxide: a physiologic molecule. Ann. Rev. Biochem. 63, 175
- Griess, P. (1879) Chem. Ber. 12, 426.
适用：液体生物样品如血液、尿、培养基中NO的检测。
组成：(500次)
- NaNO2标准品 0.5 ml (100 mmol/L)
- Griess R1 25 ml
- Griess R2 25 ml
储存：4ºC避光保存6个月有效
所需设备：96孔酶标板，可见光分光光度计，最佳波长540nm，也可选用490-550 nm进行测定，但灵敏度略降。
准备步骤：
测定前取出试剂升温到室温。
标准品稀释：每次测量均新做标准曲线，用与样品相似的液体稀释标准品。
- 取100 mmol/L NaNO2标准品8µl，加到992µl蒸馏水中，得到1000µl之800 µM管。
- 从800 µM管取200µl加入200µl蒸馏水得400µM管，然后依次取样用蒸馏水倍比稀释，得到200、100、50、25、12.5、6.25、3.13、1.57 μM管。最后设置不加标准品的0浓度管。
- 从以上各管各取50 µl 加入酶标板。
- 等待后续加入样品，以及加入Griess试剂后，一起反应并测量。
样品测量：
- 取50 µl标准品或样品，加入96孔板中。
- 每孔加入50 µl Griess R1
- 优化步骤：室温避光放置5分钟。此步骤可进一步提高灵敏度。但NO浓度较高时可省略。
- 每孔加入50 µl Griess R2。
- 室温避光放置5分钟。
- 540 nm (490-550 nm均可)测定吸光度。应在30 min内测完，以免退色降低灵敏度。
- 制备标准曲线：以吸光度OD值为x轴，标准品浓度为y轴，用Excel做图并得到标准曲线公式。
- 将样品OD值代入公式计算NO浓度。
说明：
- 在30 min内测完，以免退色而降低灵敏度。
- 快速测定：如果样品NO浓度较高，则可将Griess R1和R2预先1:1等体积混合后，各取100 µl混合试剂与50 µl样品反应测定。
- 样品所赖以存在的液体的内在成分会干扰测定，降低OD值和灵敏度。干扰程度：尿液>血清>血浆>培养基>蒸馏水。
- 每次测量必须新做标准曲线，尽量用与样品相同的液体稀释标准品。
- 细胞培养基中酚红的红色颜色不影响测定。
以下为使用普利莱NO检测试剂盒发表的文章，供参考：
1、Ji Y, Sun X, Liu X Y, et al. Toxoplasma gondii: effects of exogenous nitric oxide on egress of tachyzoites from infected macrophages[J]. Experimental parasitology, 2013, 133(1): 70-74.
2、Hong Q, Qi K, Feng Z, et al. Hyperuricemia induces endothelial dysfunction via mitochondrial Na+/Ca 2+ exchanger-mediated mitochondrial calcium overload[J]. Cell calcium, 2012, 51(5): 402-410.
3、Ding Y, Zhang Z F, Dai X Q, et al. Myricetin protects against cytokine-induced cell death in RIN-m5f β cells[J]. Journal of medicinal food, 2012, 15(8): 733-740.
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文献和实验一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；在细胞发生凋亡阶段，Caspase被激活，活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后，黄色
率的45.7%(845/1,849)。有56 例PTC死亡病例，占总死亡率的3.0%。在这些死亡病例中，45例（80.4%）BRAF V600E突变阳性。该项研究证实BRAF V600E突变阳性与PTC患者死亡率增加相关。 ADx-ARMS®技术（特异引物双扩增系统）是厦门艾德自主研发的新型核酸检测技术，也是《中华病理学杂志》公布的“基因突变检测专家共识”中推荐的技术之一。AmoyDx® BRAF V600E基因突变检测试剂盒采用ADx-ARMS®专利技术，利用新型探针在实时PCR平台
，当时是用的是PE公司的检测试剂盒，效果还不错。记得做的时候是需要加IBMX的，好像是抑制cAMP分解的 wlily sunopal_5200 wrote: 请问您做出来了吗？我也买了RD试剂盒，预实验都不理想，值太低。楼主做时加IBMX了吗？ 做得怎么样了？我最近也在做这个，做了三次，标准曲线两次做得不错，但样品浓度有差异 biodiagnosis 2010年用过
