NO检测试剂盒 E1030  厂家直销,提供OEM定制服务,大包装更优惠

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  • ¥550
  • 北京普利莱
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  • E1030
  • 2025年12月06日
    • 详细信息
    • 询价记录
    • 技术资料
    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Nitric Oxide Assay Kit

    • 库存

      大量

    • 供应商

      北京普利莱

    • CAS号

    • 保存条件

      4度避光

    • 规格

      500次

    NO检测试剂盒 英文名称:Nitric Oxide Assay Kit 货号: E1030

    描述:一种重要的气体信号分子和效应分子,可以作为第二信使参与许多生物效应和生理病理过程。体内NO含量低,半衰期短,且易被氧化。Griess反应一直是最经典的生物样品NO测定方法,反应产物的光密度OD值与NO浓度呈线性关系。本试剂盒基于Griess 反应原理,采用优化的反应条件和比色法测量液体样品NO的浓度。方法简单,线性范围2.5~800µM。按照每150 µl反应体系含50 µl样品推算,相当于样品的检测灵敏度约为300 pmol/50 µl。
    参考文献:
    1. Bredt, D.S. and Snyder, S.H. (1994) Nitric oxide: a physiologic molecule. Ann. Rev. Biochem. 63, 175
    2. Griess, P. (1879) Chem. Ber. 12, 426.

    适用:液体生物样品如血液、尿、培养基中NO的检测。

    组成:(500次)
    1. NaNO2标准品 0.5 ml (100 mmol/L)
    2. Griess R1 25 ml
    3. Griess R2 25 ml

    储存:4ºC避光保存6个月有效

    所需设备:96孔酶标板,可见光分光光度计佳波长540nm,也可选用490-550 nm进行测定,但灵敏度略降。

    准备步骤:
    测定前取出试剂升温到室温。
    标准品稀释:每次测量均新做标准曲线,用与样品相似的液体稀释标准品。
    1. 取100 mmol/L NaNO2标准品8µl,加到992µl蒸馏水中,得到1000µl之800 µM管。
    2. 从800 µM管取200µl加入200µl蒸馏水得400µM管,然后依次取样用蒸馏水倍比稀释,得到200、100、50、25、12.5、6.253.131.57 μM管。最后设置不加标准品的0浓度管。
    3. 从以上各管各取50 µl 加入酶标板。
    4. 等待后续加入样品,以及加入Griess试剂后,一起反应并测量。

    样品测量:
    1. 取50 µl标准品或样品,加入96孔板中。
    2. 每孔加入50 µl Griess R1
    3. 优化步骤:室温避光放置5分钟。此步骤可进一步提高灵敏度。但NO浓度较高时可省略。
    4. 每孔加入50 µl Griess R2。
    5. 室温避光放置5分钟。
    6. 540 nm (490-550 nm均可)测定吸光度。应在30 min内测完,以免退色降低灵敏度。
    7. 制备标准曲线:以吸光度OD值为x轴,标准品浓度为y轴,用Excel做图并得到标准曲线公式。
    8. 将样品OD值代入公式计算NO浓度。

    说明:
    1. 在30 min内测完,以免退色而降低灵敏度。
    2. 快速测定:如果样品NO浓度较高,则可将Griess R1和R2预先1:1等体积混合后,各取100 µl混合试剂50 µl样品反应测定。
    3. 样品所赖以存在的液体的内在成分会干扰测定,降低OD值和灵敏度。干扰程度:尿液>血清>血浆>培养基>蒸馏水。
    4. 每次测量必须新做标准曲线,尽量用与样品相同的液体稀释标准品。
    5. 细胞培养基中酚红红色颜色不影响测定。

    以下为使用普利莱NO检测试剂盒发表的文章,供参考:
    1、Ji Y, Sun X, Liu X Y, et al. Toxoplasma gondii: effects of exogenous nitric oxide on egress of tachyzoites from infected macrophages[J]. Experimental parasitology, 2013, 133(1): 70-74.
    2、Hong Q, Qi K, Feng Z, et al. Hyperuricemia induces endothelial dysfunction via mitochondrial Na+/Ca 2+ exchanger-mediated mitochondrial calcium overload[J]. Cell calcium, 2012, 51(5): 402-410.
    3、Ding Y, Zhang Z F, Dai X Q, et al. Myricetin protects against cytokine-induced cell death in RIN-m5f β cells[J]. Journal of medicinal food, 2012, 15(8): 733-740.

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