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- 2026年01月17日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
cas9 Nuclease
- 保质期：
12 months
- 供应商：
广州博徕斯生物科技股份有限公司
- 保存条件：
-20摄氏度
产品特性
- 本产品由一株含有Streptococcus pyogenes Cas9基因的E.coli表达、纯化后获得。
- 含核定位序列
- 分子量：约为175 kD
- 储存条件： -20°C
- 蛋白纯度：> 90％
- 基因敲除；
- 基因敲入；
- 基因修正；
- 基因突变。
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文献和实验40 个），在 Cas9 切开双链之后，模板的两臂同源序列直接互补（HDR，同源修复），从而完成了基因编辑。聪不聪明！上传一张自己的理解图4. Clonal isolation of cell lines 将已编辑的细胞分离开来这个很好理解，在编辑片段中加入抗生素抗性基因或者荧光基因后，可通过抗生素筛选或者 FACS 分离。5. Functional testing 功能验证（1）SURVEYOR nuclease assay（2）Detection of indels or HDR
CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具，今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作，仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒，如下图所示： 酶切系统 37 ℃, 3 hr；Run 1% gel，回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端，以利于下游 oligo 退火产物的连接；酶切时请充分，且绝对不能加 CIP 处理
CRISPR/Cas 是进行基因编辑的强大工具，可以对基因进行定点的精确编辑。在向导 RNA（guide RNA， gRNA）和 Cas9 蛋白的参与下，待编辑的细胞基因组 DNA 将被看作病毒或外源 DNA，被精确剪切。一、寻找目的基因的靶标使用在线设计网站 CRISPR direct，如需直接复制网址，可在生物学霸后台对话框回复 direct即可。靶点挑选要点：基因敲除靶点应设计在起始密码子附近（包括起始密码子）或者起始密码子下游的外显子范围内。不同 Cas9/gRNA 靶点在基因敲除效率
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