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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
LabEx
产品描述
本产品为LabEx提供的PLA可视化蛋白互作检测服务,采用24孔板规格,基于邻近连接分析(Proximity Ligation Assay,PLA)技术,在细胞或组织样本中原位检测两种目标蛋白之间的相互作用。当两个靶蛋白在空间上足够接近时,与其分别结合的一对抗体所携带的寡核苷酸探针可通过连接反应形成环状DNA模板,再经滚环扩增产生可检测的信号,每个荧光亮点对应一对相互作用的蛋白分子。
该服务将抗体识别的特异性与核酸扩增的信号放大能力相结合,可在保持细胞形态的前提下观察蛋白互作的发生与分布,适合需要验证内源性蛋白相互作用的研究课题。
产品规格
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服务形式:蛋白互作检测服务(PLA技术)
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规格:24孔板
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检测原理:邻近连接分析(Proximity Ligation Assay,PLA)
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信号形式:离散点状荧光信号,每个亮点代表一对相互作用的蛋白分子
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价格:¥1,500.00 /样
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交付周期:需咨询
应用建议
本检测服务适用于蛋白相互作用研究,常见应用场景包括但不限于:
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内源性蛋白互作验证:在细胞或组织原位验证两种目标蛋白是否存在物理上的近距离相互作用。
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蛋白复合物组分分析:观察特定蛋白与其结合伙伴在亚细胞结构中的共定位与相互作用情况。
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信号通路机制研究:分析受体二聚化、激酶与底物结合等信号转导过程中的蛋白互作事件。
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低丰度或弱相互作用检测:借助滚环扩增的信号放大效应,检测常规方法难以捕捉的弱相互作用。
背景信息
邻近连接分析(PLA)是一种将抗体特异性识别与核酸扩增技术相结合的原位蛋白检测方法。其实验流程大致如下:首先对样本进行封闭,随后孵育两种针对目标蛋白的一抗;接着加入与专有寡核苷酸臂偶联的Navenibody,使其与各自的一抗结合;当两个Navenibody因靶蛋白相互作用而靠近时,其附着的寡聚物可形成DNA环(DNA circle),这一步骤有助于降低非特异性背景、保证检测特异性;最后加入聚合酶启动滚环扩增,标记探针与扩增产物结合后显色形成亮点。
与传统免疫共沉淀或免疫荧光共定位相比,PLA的优势在于能够在保持细胞形态完整的前提下,以较高的空间分辨率判断两个蛋白是否真正发生近距离相互作用,而非仅仅处于同一区域。该技术对弱相互作用和低丰度蛋白也具备一定的检测能力,已广泛应用于细胞信号转导、受体二聚化及蛋白复合物组装等研究方向。
保存条件
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本产品为检测服务,不涉及实体试剂的储存。
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样本的采集、处理与保存需按照服务提供方的规范执行。建议样本采集后尽快进行固定与前处理,若需暂存应置于适当条件并避免反复冻融,以保持蛋白相互作用的原始状态。
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样本类型、细胞或组织用量要求、抗体选择及具体实验方案,请提前与LabEx技术支持团队沟通确认,以确保检测流程顺利开展。
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