还原型谷胱甘肽 (GSH)实验代测服务

还原型谷胱甘肽 (GSH)实验代测服务

谷胱甘肽（GSH，还原型）是广泛存在于细胞中的活性三肽，由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸构成，核心活性基团为半胱氨酸上的巯基。体内包含还原型 GSH 与氧化型 ，二者比值是衡量细胞氧化还原水平的重要指标。它能够清除自由基，减少氧化损伤，保护蛋白质与 DNA。

检测常用比色法开展分析，原理依托 GSH 可与特定显色试剂发生特异性反应，生成具备光吸收特性的产物。产物在特定波长下的吸光度值，与体系内 GSH 含量存在对应关系，借助标准品绘制标准曲线，结合样本检测吸光读数，可计算得到样本中 GSH 含量。

实验流程：

1. 样品准备

血清、血浆、透明液体状样本、动植物组织，细胞等

2. 检测前准备

处理样本，配制试剂

3. 检测步骤

加样-加试剂-显色反应后酶标仪读数

4. 实验结果

样本OD值代入公式计算出结果，以EXCEL形式发出

样品收集、处理及保存方法：

以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠-氮钠做为防腐剂。

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.  血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.  细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

4.  组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。