外泌体技术服务

公司特色服务
 外泌体提取：超速离心法/试剂盒法/磁珠法，来源：细胞培养上清、血清、血浆、脑脊液、腹水、胸水、尿液、组织样本等；
 外泌体鉴定：NTA粒径、透射电镜、Western blot、流式检测；
 外泌体示踪：细胞对外泌体摄取行为（PKH67/PKH26/DIO/DIL等）；
 外泌体载药：siRNA、质粒等；
 外泌体高通量测序：miRNA测序、lncRNA测序、circRNA测序、mRNA测序、全转录组测序；
 外泌体芯片检测：lncRNA芯片、circRNA芯片、miNRA芯片；
 外泌体实时荧光定量PCR检测：miRNA/lncRNA/mRNA/circRNA；
 外泌体蛋白质组学检测：Label-free/iTRAQ/TMT/DIA；
 外泌体代谢组学检测：LC-MS、GC-MS；
 外泌体细胞功能检测：细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期、细胞迁移、细胞侵袭、克隆形成、细胞粘附、细胞辐射、细胞焦亡等；
 外泌体动物功能及病理检测研究：动物模型复制及给药、皮下/原位荷瘤、外泌体注射、活体成像、免疫荧光、免疫组化、HE染色等；
 外泌体miRNA靶基因验证：双荧光素酶报告基因检测；
 外泌体整体课题服务：外泌体方案定制设计及实验。
外泌体载药服务，详情请点链接：https://www.biomart.cn/infosupply/104054943.htm
 铁死亡研究服务，详情请点链接：https://www.biomart.cn/infosupply/88326263.htm
 细胞自噬研究服务，详情请点链接：https://www.biomart.cn/infosupply/88501567.htm
 细胞焦亡研究服务，详情请点击链接：https://www.biomart.cn/infosupply/88332598.htm
 甲基化研究服务，详情请点链接：https://www.biomart.cn/infosupply/88333870.htm
                                                      
服务内容简介
外泌体超速离心
     超速离心是从生物体液或细胞上清分离外泌体的金标准方法。采用低速离心、高速离心交替进行，可分离到大小相近的囊泡颗粒。目前在国外的重要期刊如Cell、Nature、Science以及其众多子刊中，超速离心是普遍应用的经典技术手段。
     研载生物外泌体提取平台，有超速离心机，可满足大批量样本超离的需求。同时，研载生物的外泌体超速离心实验体系在经典的实验方法上进行了大量的优化和调整，显著提高了外泌体超速离心的得率和稳定性。研载生物的外泌体超离平台不但可以进行外泌体的提取工作，还可承接无外泌体血清制备项目。

外泌体鉴定服务
    对分离提取的外泌体进行鉴定的经典方案有：NTA分析（Nanoparticle Tracking Analysis）、电镜分析、蛋白标志物Western Blot鉴定等。研载生物拥有完善的外泌体鉴定平台和技术体系，可提供全方位的外泌体鉴定服务。
 NTA粒径分析
纳米颗粒跟踪分析（Nanoparticle TrackingAnalysis, NTA）是对每个颗粒的布朗运动进行追踪和分析，结合Stockes-Einstein方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度，检测10nm–1000nm 范围内的颗粒。NTA技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一；相较于其他表征方式，NTA技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。

外泌体电镜分析
   双层囊膜结构（茶托状）是外泌体重要标志之一，但普通光学显微镜难以观察到此种亚显微结构。而透射电子显微镜 (Transmission electron microscope, TEM) 分辨率可达0.1 - 0.2 nm，可将被观察物体放大至数百万倍，是外泌体双层囊膜超微结构观测的经典方法。研载生物有多种外泌体样品和上千张外泌体电镜图片的拍摄经验，在制样、拍摄、选片等方面具备丰富经验。

外泌体标志物鉴定
   研载生物通过对经典文献中普遍采用的抗体进行验证和挑选，优选了多种外泌体标志物抗体，如CD9、CD63、CD81、HSP70、TSG101、Alix等，针对不同来源的外泌体，我们还可协助用户对标志物进行合理选择，并可提供常见外泌体标志物的Western blot检测服务。

外泌体分析
    研载生物可提供多种外泌体数分析服务，包括：外泌体蛋白质谱分析、外泌体分泌蛋白筛选、外泌体microRNA测序、外泌体microRNA芯片分析、外泌体lncRNA芯片检测等。
外泌体microRNA/lncRNA/circRNA筛选
研载生物采用独特的外泌体RNA抽提技术，微量RNA建库技术、高通量测序/芯片结合生物信息分析平台，可提供miRNA测序（10M）、miRNA芯片、lncRNA芯片、circRNA芯片检测服务。

荧光定量PCR实验
外泌体内的miRNA、lncRNA和cirRNA表达低，检测难度大，内参选择尚不确定。研载生物凭借多年检测外泌体miRNA，lncRNA和circRNA的项目服务经验，提供高质量的检测服务。
               

外泌体蛋白组分析
    研载生物拥有LC-MS/MS技术合作平台， 针对不同的研究需求，为客户推荐合适的技术：Label free、iTRAQ、TMT及DIA等。

外泌体示踪/示踪/摄取行为
       对分离的外泌体进行体外标记或货梯示踪，有助于对外泌体的功能进行进一步的研究。研载生物提供外泌体PKH-67（green）、PKH-26(red)、DIO(green）及DIL(red）等亲脂性染料的染色服务，使用ActinRed对细胞骨架进行染色，DAPI对细胞核染色，激光共聚焦显微镜拍照，结果可靠。
       研载生物提供PKH67染色试剂盒分装，规格为5次装和10次装。

外泌体细胞功能检测
   研载生物拥有多年细胞实验经验，可提供细胞增殖检测、细胞凋亡检测、细胞周期检测、细胞迁移检测、细胞侵袭检测、克隆形成实验、流式检测、细胞粘福附、细胞辐射、细胞焦亡等实验服务。

外泌体动物功能实验
   研载生物提供常规动物实验（造模）及病理检测技术服务。
   疾病动物模型包括：神经系统疾病模型、心血管系统疾病模型、消化系统疾病模型、内分泌系统疾病模型、泌尿系统疾病模型、骨骼疾病动物模型、免疫缺陷小鼠肿瘤皮下/原位成瘤模型、小动物活体成像等。
                        

外泌体整体课题服务
外泌体整体路线图：



外泌体经典应用案例：
外泌体biomarker研究：
Sputum exosomes: promising biomarkers for idiopathic pulmonary fibrosis. Thorax, 9.655.
研究思路：特发性肺纤维化（IPF）是一种病原体未知的进行性纤维化间质性肺病。作者通过miRNA芯片检测IPF患者唾液外泌体的miRNA含量，发现IPF患者和健康受试者之间的唾液外泌体miRNA水平存在显著差异，并鉴定了三种特征性miRNA。此外，作者发现miR-142-3p与肺部对一氧hua碳/肺泡体积的扩散能力呈负相关。
技术路线及结果（部分）：

外泌体胰腺癌机制研究：
Hypoxic tumor-derived exosomal miR-301a mediates M2 macrophage polarization via PTEN/PI3Kγ to promote pancreatic cancer metastasis. Cancer Research, IF=9.130. 
研究思路：缺氧诱导的外泌体miRNA通过PTEN /PI3Kγ介导M2巨噬细胞极化以促进胰腺癌转移。
技术路线及结果（部分）：