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- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
里德赛生物
- 服务名称:
iPSC诱导多能干细胞重编程
iPSC 诱导多能干细胞重编程建系服务简介
诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,简称 iPSCs),是指通过向终末分化的体细胞中导入特定转录因子,实现细胞重编程而获得的多能性干细胞。自 2006 年相关研究成果首次报道以来,iPSCs 技术便被广泛认为是有望为再生医学领域带来革命性突破的重要发现,其应用场景已涵盖细胞治疗、疾病模型构建及药物研发等多个关键领域。
通过系统性优化重编程因子组合与实验操作流程,我们以外周血细胞或成纤维细胞为原始母细胞,开展 iPSCs 重编程制备工作,目前该技术的成功率已稳定达到 95% 以上。与此同时,我们建立了完善的质量控制体系,可有效保障所制备 iPSCs 的多能性特征;此外,本研究采用的技术方法具有无重编程因子基因组整合的显著优势,这一特性大幅降低了后续衍生产品在临床应用中的致瘤风险。
iPSC 诱导多能干细胞重编程建系服务内容
|
服务项目 |
检查质量标准 |
检查方法 |
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细胞活率 |
冷冻前≥90%,且复苏后≥60% |
细胞计数法 |
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重编程质粒残留 |
重编程质粒检测阴性 |
PCR-电泳 |
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细胞形态 |
应呈克隆生长、克隆边缘清晰、核质比高、形态均 一,克隆内细胞与细胞之间接触紧密 |
显微镜镜检 |
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支原体检测 |
检测阴性(PCR) |
PCR-电泳 |
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细胞标志蛋白 |
多能性标记物染色 |
免疫荧光 |
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STR鉴定 |
与母系细胞同源 |
STR分析 |
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染色体核型 |
应为46,XX或46,XY |
G-banding |
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畸胎瘤 |
应形成具有三胚层结构的畸胎瘤 |
NOG小鼠皮下接种 |
|
多能性-三胚层 |
三胚层分化及染色鉴定 |
体外分化染色 |

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文献和实验Stem Cell Rep:高绍荣团队揭示 Mettl14 以不依赖于 m⁶A 的方式驱动衰老相关分泌表型促进体细胞重编程
的方式调控 SASP 基因表达水平 6。因此,研究者推测,在重编程晚期,Mettl14 上调的这些基因为 SASP 基因。进一步研究发现,在重编程晚期,这些 SASP 基因的表达水平显著升高,但是,在建系的 iPSC 中几乎不表达。 为了进一步研究 SASP 与重编程的关系,研究者进行了细胞上清共培养实验及 SASP 因子共培养实验 (图 2)。结果表明,重编程过程的细胞上清或 SASP 因子(如 IL6)可以促进重编程后期的细胞转变为多能干细胞。同时,对细胞进行碱性磷酸酶 AP 染色和 β
特点类似ES细胞的克隆, 即iPS细胞。而且, 这些iPS细胞表达ES细胞的特异性标志基因。为何仅仅几个因子的导入如何就能够诱导体细胞发生重编程而具有多能性呢?根据目前的研究研究结果可知, ES细胞的多能性受到转录因子网络和表观遗传学的复杂调控, 但实际上,仅靠操纵几个基因的表达就可诱导出多能性的体细胞。接下来介绍导入的这几个因子Oct4/Sox2/Klf4/c-Myc 和Oct4/Sox2/Nanog/Lin28在多能性调控中的作用. Oct4, Sox2 和Nanog 这3个转录因子在ES 细胞
2、 TetraOneTM 基因敲除——成熟、修饰准确、效果稳定,制作周期只需 6 个月 TetraOneTM 基因敲除是业界推出的的新技术,沿用 ES 细胞同源重组的技术体系,采用独特的建系和基因改造技术建立了具有遗传优势的 TetraOneTM ES 细胞系,通过胚胎发育前期的显微注射,使TetraOneTM ES 细胞100% 代替内源 ES 细胞,实现跨越“嵌合体”阶段从而快速获得去 Neo 杂合子小鼠的基因打靶专利技术。 TetraOneTM 技术是基于 ES 细胞打靶技术的金标











