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心肌细胞定向分化技术服务
| 服务项目 | 基本程序 | 验收标准 | 时间 |
| 心肌细胞分化和纯化 | 稳定传代的单克隆进行心肌分化的条件摸索并分化出足量满足后续检测的心肌细胞 | 分化的心肌细胞过程中三个关键节点的视频及纯化后的心肌细胞(心肌细胞搏动视频 15s各2段) | 1-2个月 |
| 心肌细胞的功能验证-免疫荧光染色 | 免疫荧光染色α-actinin,TNNT2 | 细胞免疫荧光照片 | 20天 |
| 心肌细胞相关基因RT-PCR检测 | RT-PCR看NKX2-5,MYH6,MYH7,MLC2V,KCNH2,OCT4,NANOG在ips和相应的心肌细胞中的表达情况 | RT-PCR结果图 | 30天 |
| 心肌细胞场电位、动作电位、收缩等检测 | MEA检测各项数据 | 场电位:Beat Period, FPD,FPDc,Spike Amplitude 动作电位AP(30), APD(50),APD(90) 收缩:跳动振幅(提交变化量),兴奋-收缩延迟 |
30天左右 |
| 实验报告 | 收到结果,撰写实验报告 | 结构清晰,数据图表完整 | 10天 |
| 合计 | 3-5个月 | ||
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文献和实验成搏动的心肌细胞,并在此基础上首次利用胚胎干细胞成功地构建了新药筛选模型。到目前为止,他们已在实验室中先后两次成功地培养出了总共30个自主跳动的单一心肌细胞团,分化成功率已高达80%。实验室观察表明,这些细胞团均具有正常心肌细胞的自律性、应激性和兴奋性。据介绍,在成功分化出心肌细胞的基础上,课题组将于近期开始定向分化单一的神经细胞和胰岛细胞的工作。 这一成果的重大意义在于:单一细胞的形成过程重现了胚胎细胞发育过程的全部生物信息,反映人类疾病的发生机制和发展过程,并提供了药物作用的重要靶点,从而在世
什么是分化? 在生物学上,分化是指细胞从未分化状态转变为具有特定结构和功能的成熟细胞的过程。它不仅仅指细胞获得功能的过程,更多时候指的是细胞如何维持其原有的分化状态,或者在某些诱导条件下进一步特化。这是一个单向的、逐步限制细胞潜能的过程:多能干细胞→祖细胞→前体细胞→终末分化细胞。 在体内,分化使细胞获得"专业技能":心肌细胞学会收缩,神经元传递信号,β细胞分泌胰岛素。这些细胞一旦成熟,通常不再分裂,专心执行功能。 然而在体外原代培养中,情况变得复杂起来。细胞在培养皿中的"身份"变得
类型,来替代那些受损的体内组织,比如把产生胰岛素的细胞植入糖尿病患者体内。科学家们已经能够使猪ES细胞转变为跳动的心肌细胞 ,使人ES细胞生成神经细胞和间充质细胞 和使小鼠ES细胞分化为内胚层细胞 。这些结果为细胞 和组织替代疗法开辟了道路。目前,科学家已成功分离到人ES细胞 (Thomson等1998,Science),而体细胞克隆技术为生产患者自身的ES细胞提供了可能。把患者体细胞移植到去核卵母细胞 中形成重组胚,把重组胚体外培养到囊胚,然后从囊胚内分离出ES细胞 ,获得的ES细胞 使之定向分化为所需的特定
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