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- 北京
- 2026年08月13日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 英文名：
Protease And Phosphatase Inhibitor Cocktail For Mammalian Cell And Tissue Extracts，50X
- 保质期：
保存在-20℃，避光，1年。
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- 保存条件：
保存在-20℃，避光，1年。
- 规格：
100T
哺乳动物细胞或组织提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
本产品用于哺乳动物细胞或组织蛋白提取的蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物，包含了广谱的丝氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白酶抑制剂/氨基肽酶抑制剂，以及丝氨酸/苏氨酸、酪氨酸、酸性及碱性磷酸酶抑制剂。如用于检测金属蛋白酶活性，则不宜添加EDTA。以1:50的比例分别把蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用，50×)，磷酸酶抑制剂(50×)和0.25MEDTA加入裂解液中，即可用于哺乳动物细胞或组织蛋白的提取，并有效抑制蛋白降解。
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文献和实验哺乳动物组织样品RNA的抽提最基本的要素是防止RNA在抽提过程中降解，以及尽可能得到最高的RNA抽提效率。以下介绍我们实验室认为最符合以上两个要素的抽提方法。一、实验材料：Trizol试剂（Invitrogen公司）研钵，匀浆器，镊子，铝箔都高温灭菌即可；二、具体过程：1、样品在离体后应迅速冷冻在液氮中，若是比较大块的组织，要尽量把组织剪切成黄豆大小的块，使液氮迅速渗透到组织内部而防止组织内部的RNA降解。组织用铝箔包好或放入冻存管中，并做好记号，注意不要把记号写在纸上，以防纸被组织的血水渗透
相关专题 蛋白酶抑制剂 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低，尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。在宝灵曼公司
剂的蛋白质抽提剂（107 个细胞中加入1ml抽提试剂；5×106 个细胞中加入0.5ml抽提试剂），轻轻摇动5分钟5、细胞悬浮液到离心管中，冰浴下摇动15分钟进行裂解。6、裂解液于预冷的离心机中14，000×g离心15分钟。弃去沉淀，上清液蛋白质抽提物立刻转移入新的离心管中保存待用（-80o C或液氮中）。三、哺乳动物组织的蛋白质抽提步骤1、组织称重，切小块放入管中。3、PriCells蛋白质抽提剂（1ml抽提试剂中加入5μl蛋白酶抑制剂混合液\5μlPMSF和5μl磷酸酶混合液等等）。3、加入预冷
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