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Western Blot 实验试剂选购指南

100pg 显色法 推荐产品: SuperECL Plus Western Blotting 超敏发光液 采用独特的发光底物系统，是世界上最灵敏的ECL Western Blot 化学发光试剂。用于Western Blotting 条带的荧光发光，检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP 的抗体及其关联的抗原。由两种溶液组成，使用前混合

选择WB（Western Blot）底物显色方法的关键

同时存在的情况下发光，因此特别适合在同一膜上对不同的靶蛋白进行多重检测。目前最高检测灵敏度已达到Femto水平，已成为最安全、最灵敏的WB检测方法。在许多研究者的心目中，ECL几乎已经成为化学发光的代名词，一般含有Luminol、H2O2和发光增强剂等物质。发光试剂中的Luminol被HRP和H2O2氧化产生荧光，荧光被发光增强剂增强。 化学发光常见的问题是抗体的浓度过高，所以抗体的量要比规定的稀释量加大，以保证底物不会因为HRP过量而过快用完，导致结果不稳定。  

【原创】Western Blot经验总结

，但是经过SDS－PAGE变性胶电泳的蛋白质可能由于原来的识别位点构象发生改变而不被识别。多抗不如单抗专一性高但更容易得到结果。 4、简易的WB——“不知道是否有表达，比如抗体少还要摸条件（稀释度），可以用剪膜剩下的边角料来先做几组点杂交摸条件，省点时间省点试剂” 5、WB中Tween－20的作用： 吐温是一种非离子型表面活性剂，可以洗掉一些非特异性结合的蛋白和抗体，降低背景。 6、ECL荧光淬灭的问题： 二抗浓度过高，HRP浓度过高，会超速催化底物生成产物使膜发黄。所以二抗