- ￥450 - 800
- 雅礼生物
- YTD38003
- 苏州
- 2026年07月04日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
99
- 英文名：
YALEPIC® Universal Seamless Cloning and Assembly MasterMix
- 保质期：
24个月
- 供应商：
雅礼（江苏）生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃ 保存，＜ 0℃ 运输。
- 规格：
100rxns
一步法同源重组，突破酶切位点限制，适配高通量载体构建实验
预混Mix ，1~11片段，5~15min，50℃，克隆阳性率>95%，不含control
产品简介
- YALEPIC® 通用型无缝克隆同源重组酶预混 Mix是雅礼生物基于同源重组原理自主研发的一步法通用型等温无缝克隆预混液，属于非连接酶依赖型克隆体系。该产品可将含有15~25 bp同源重叠序列的插入片段（单片段或多至11个顺序拼接片段），在50℃、仅需5~15分钟内快速、定向、准确地重组至任何载体的任何位点，不受传统酶切位点限制。
- 本产品核心优势在于：载体自连背景极低，显著提升重组效率及对杂质的耐受度，制备的高纯度线性化载体和插入片段可不纯化直接用于重组克隆，极大简化操作流程。产品具有高保真、高效、便捷的DNA连接性能，克隆阳性率高达95%以上，广泛适用于基因文库构建、重组蛋白表达载体构建、多位点定点突变、高通量克隆等分子生物学应用场景。
产品优势
| 优势亮点 | 详细说明 |
|---|---|
| 多片段高效组装 | 支持1～11个DNA片段的一步法无缝拼接，文库构建与多基因共表达载体构建更轻松 |
| 极速反应 | 50℃恒温孵育仅需5～15分钟即可完成重组，大幅缩短克隆周期 |
| 超高阳性率 | 克隆阳性率高达95%以上，显著减少筛选工作量 |
| 载体自连极低 | 非连接酶依赖型体系，无需去磷酸化处理，背景极低 |
| 杂质耐受度高 | 高纯度DNA可不纯化直接使用，未纯化产物体积不超过反应体系1/5即可有效反应 |
| 灵活通用 | 不受酶切位点限制，可将插入片段定向克隆至任何载体的任何位点 |
| 预混Mix即用型 | 2×预混液，仅需添加模板和引物即可启动反应，操作极其简便 |
适用范围
- 重组蛋白表达载体构建：原核 / 真核表达质粒多片段插入、启动子 + 目的基因 + 终止子串联组装；
- 多位点定点突变载体改造：单基因多位点突变、质粒骨架快速突变编辑；
- 高通量基因文库构建：随机片段文库、CRISPR sgRNA 文库高通量无缝拼接；
- 多基因簇合成与载体改造：微生物代谢通路多基因串联组装、穿梭质粒骨架重构；
- 普通单片段定向无缝克隆：常规基因过表达质粒、敲除载体构建。
FAQ
Q1：YALEPIC 无缝克隆需要设计多长的同源臂序列？
Q2：试剂盒最多能组装多少个 DNA 片段？
Q3：PCR 产物没有胶回收纯化，可以直接用这个试剂盒做无缝克隆吗？
Q4：无缝克隆标准反应温度和孵育时间是多少？可以延长反应时间吗？
Q5：阳性克隆率偏低、大量空质粒是什么原因，怎么解决？
Q6：使用时载体和插入片段最佳摩尔配比是多少？
Q7：试剂盒 – 20℃保存反复冻融会影响酶活吗？
Q8：这款试剂能不能用来做质粒定点突变实验？
Q9：试剂盒不含对照品，需要自行配置阴性对照吗？
Q10：可以用该试剂盒构建基因筛选文库、CRISPR 文库吗？
Q11：不同来源（平末端 / 粘性末端）的线性化载体都能用吗？
Q12：100rxns 规格的试剂盒单次反应加样体系是多少？
A：常规 10μL 标准反应体系，MasterMix 添加 5μL，剩余体积由载体 + 各插入片段补水补齐，100rxns 规格可完成 100 次标准 10μL 反应。
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文献和实验，扩增目标片段 扩增片段与线性化载体、组装预混酶混合反应 转化感受态细胞 · Step 1 · 如果载体上正好有合适插入目标片段的酶切位点，酶切载体使之线性化。为了降低单酶切载体不完全的几率，减少载体自连和提高筛选成功率，强烈建议双酶切——后面一个切点只要距离第一个切点 5 个碱基以上就行（主要是给两个酶留出结合空间）。如果没有合适的酶切位点，根据选定插入位点设计引物，用反向 PCR 来获得线性化载体。在多片段组装克隆的世界里，凡是酶切搞不定的，统统 PCR 引物设计搞定。简单粗暴有效。 ·
%，避免引物内含有互补序列，3』端尽量不要出现含有连续三个以上的 G 或 C 的片段，真核基因设计引物时最好跨内含子哦。 选择合适 ROX 参照染料 各位同学在选购产品、做实验时，首先要弄清自己实验室的仪器对应哪种 ROX（High 还是 Low）！试剂买回来，样也加好了，最后发现不能用在自家仪器上，内心也一定是很崩溃。诺唯赞的染料法荧光定量专用预混液提供各种 ROX 供选择，如果不想这么麻烦，ChamQTM Universal SYBR® qPCR Master Mix （Q711）那是极好
注意的是，两种配体的洗脱和再生buffer稍有差别，使用的时候还需注意！ 系统特点 高达 pM 范围的亲和力(KD up to 6.2 x 10-11 M) 纯化树脂材质稳定 小标签 (8-28 aa)无需移除，不影响蛋白折叠和功能 极高的蛋白纯度（纯度＞95%） 应用于多种目标蛋白检测系统：Western blot, ELISA, 免疫荧光, FACS等 兼容多种缓冲条件：高盐，洗涤剂，金属离子，螯合剂，还原剂 适用于多种蛋白的纯化 Twin-Strep-tag®标签蛋白固定在界面上时 (SPR
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